金銀花水提物與益生菌治療過敏小鼠作用比較.pdf

1、第一部分金銀花水提物對過敏小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的體外作用 【目的】探討金銀花水提物對卵清蛋白(Ovalbumin OVA)介導(dǎo)的BALB/c小鼠腹腔巨噬細(xì)胞體外作用。 【方法】對象：選用4～5周齡無雞蛋喂養(yǎng)的BALB/c雌鼠為實(shí)驗(yàn)對象，經(jīng)OVA腸道致敏、激發(fā)。方法：用50％ 25％、12.5％、6.25％、3.125％、1.0625％的金銀花水提物體外誘導(dǎo)過敏小鼠腹腔巨噬細(xì)胞24h，測定細(xì)胞吞噬中性紅的能力及MTT法測定巨噬

2、細(xì)胞代謝水平。 【結(jié)果】金銀花水提物濃度≥6.25％時(shí)，OVA介導(dǎo)的過敏小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬中性紅能力及細(xì)胞代謝水平顯著提高。 【結(jié)論】體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示較高濃度金銀花水提物可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬能力與細(xì)胞代謝水平，提示金銀花水提物可激活過敏小鼠腹腔巨噬細(xì)胞。 第二部分金銀花水提物與益生菌治療過敏小鼠作用比較 【目的】探討金銀花水提物與雙歧桿菌、乳酸桿菌治療OVA介導(dǎo)的BALB/c小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的比較。

3、 【方法】對象：選用4～5周齡無雞蛋喂養(yǎng)的BALB/c雌鼠，經(jīng)OVA腸道致敏、激發(fā)后根據(jù)灌服不同的藥物隨機(jī)分為金銀花水提物高(LTH100％)、中(LTM 50％)濃度組，益生菌(PT)組，同時(shí)設(shè)置生理鹽水為陰性對照(NS)組和單純OVA腸道激發(fā)為陽性對照(Ch)組。 方法：(1)瑞氏染色觀察金銀花水提物、益生菌對速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的能力；(2)HE染色及甲苯胺蘭染色觀察金銀花水提物、益生菌對OVA過

4、敏BALB/c小鼠小腸組織形態(tài)的影響；(3)采用平板活菌計(jì)數(shù)法分析小鼠腸道雙歧桿菌、乳酸桿菌的變化，PCR分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行細(xì)菌鑒定；(4)ELISA法檢測小鼠血清OVA特異性IgE、IgG2a水平；(5)ELISA法檢測小鼠小腸粘液總IgA、OVA特異性IgA含量。 【結(jié)果】致敏小鼠灌服金銀花水提物和益生菌后：(1)小鼠小腸絨毛上皮細(xì)胞局灶性壞死、脫落，固有層淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤現(xiàn)象明顯改善；(2)不腸肥大細(xì)胞聚集和

5、脫顆粒現(xiàn)象緩解，小腸固有層肥大細(xì)胞得以恢復(fù)；(3)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞百分率與吞噬指數(shù)明顯提高；(4)金銀花與益生菌灌服致敏小鼠后，以高濃度金銀花組小鼠腸道雙歧桿菌增加最多，中濃度金銀花組與益生菌組小鼠腸道雙歧桿菌、乳酸桿菌增加無明顯差別；(5)致敏小鼠血清OVA特異性IgE下降，OVA特異性IgG2a增加，致OVA特異性IgE/IgG2a比值下降，以金銀花水提物作用最明顯；(6)高濃度金銀花灌服致敏小鼠的腸道總IgA、OVA特

6、異性IgA水平高于益生菌組。 【結(jié)論】國內(nèi)首次研究比較金銀花與益生菌治療OVA介導(dǎo)的過敏小鼠速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，證實(shí)金銀花與益生菌均有明顯改善過敏小鼠的過敏癥狀作用，高濃度金銀花水提物治療效果較益生菌更好。金銀花水提物與益生菌灌服OVA。介導(dǎo)的致敏小鼠10日后： (1)腸道粘膜肥大細(xì)胞脫顆粒、聚集現(xiàn)象明顯改善，小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能提高； (2)小鼠腸道雙歧桿菌、乳酸桿菌增多，以高濃度金銀花組小鼠小腸雙歧桿菌增加為

7、著； (3)兩者均可降低過敏小鼠體內(nèi)OVA特異性IgE水平，升高OVA特異性IgG2a，即SIgE/SlgG2a的比值降低，提示有調(diào)節(jié)Th2/Th1細(xì)胞平衡作用； (4)灌服金銀花水提物與益生菌的致敏小鼠腸道局部SIgA含量增加，以高濃度金銀花增加小鼠腸道SIgA最明顯，提示金銀花水提物能有效增強(qiáng)腸道粘膜免疫，促進(jìn)有害抗原的清除，防止炎癥的擴(kuò)散； (5)中濃度金銀花組與益生菌組小鼠腸道益生菌數(shù)量相近，但中濃度金銀