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1、目的:探討葉酸缺乏對(duì)孕鼠子代在胚胎發(fā)育過(guò)程中心臟超微結(jié)構(gòu)和心臟組織中GATA-4、NKx2.5基因及蛋白表達(dá)情況的影響。 方法:(1)成熟雌性SD大鼠36只隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組18只和對(duì)照組18只,分別喂以缺乏葉酸飼料和含葉酸飼料兩周后與成熟SD雄性大鼠交配;于純合飼料喂養(yǎng)前、喂養(yǎng)兩周后、雌鼠孕初期、孕晚期分別監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組雌鼠血清葉酸水平;(2)電鏡下觀察新生鼠心臟的超微結(jié)構(gòu);(3)用RT-PCR方法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組胚胎及新生
2、鼠心臟中GATA-4、NKx2.5基因在三個(gè)時(shí)期的表達(dá);(4)Western-blotting方法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組三個(gè)時(shí)期心臟中GATA-4、NKx2.5蛋白水平的表達(dá)。 結(jié)果:(1)純合飼料喂養(yǎng)前,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組雌鼠血清葉酸水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),純合飼料喂養(yǎng)兩周后實(shí)驗(yàn)組雌鼠血清葉酸水平低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);孕初期和孕晚期實(shí)驗(yàn)組雌鼠血清葉酸水平持續(xù)下降并保持低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<
3、0.05)同時(shí)對(duì)照組在孕晚期血清葉酸水平也較孕初期下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);(2)實(shí)驗(yàn)組新生鼠心臟電鏡下肌細(xì)胞胞漿內(nèi)膜性結(jié)構(gòu)退行性變、肌絲明暗帶(Z帶)不清、線粒體內(nèi)基質(zhì)凝結(jié)、肌漿網(wǎng)擴(kuò)張;而對(duì)照組正常或破壞很輕;(3)GATA-4、NKx2.5基因在三個(gè)時(shí)期相對(duì)表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);(4)GATA-4、NKx2.5基因所對(duì)應(yīng)的蛋白在三個(gè)時(shí)期表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0
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