c-Met和整合素α5β1在賁門癌中的表達(dá)及其相關(guān)性的研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)（遼寧）博士學(xué)位論文cMet和整合素α5β1在賁門癌中的表達(dá)及其相關(guān)性的研究姓名：遲福生申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：王者生200904plaques)的相互作用，并在表達(dá)上有相互影響。對(duì)這種交互作用的認(rèn)識(shí)，將有助于進(jìn)一步加深對(duì)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的認(rèn)識(shí)。為了更加深入地了解賁門癌的分子生物學(xué)特征，揭示賁門癌的發(fā)病機(jī)制，本研究利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(ImPCR)，Westernblot和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)賁門癌組織中c

2、Met和整合素0【5pl的表達(dá)，探討其與賁門癌臨床病理因素的關(guān)系及二者的相關(guān)性。材料與方法一、實(shí)驗(yàn)材料收集自遼寧省腫瘤醫(yī)院及遼寧省人民醫(yī)院2006年10月至1J2007年10月間的賁門腺癌組織標(biāo)本45例。取距癌灶5cm以上的正常胃黏膜組織作對(duì)照。另收集自遼寧省腫瘤醫(yī)院及遼寧省人民醫(yī)院2004年1月一2007年5月間經(jīng)手術(shù)及病理證實(shí)為腺癌且保存完好的賁門癌組織蠟塊102例，同期選取正常胃黏膜組織蠟塊36例做對(duì)照。所有患者術(shù)前未經(jīng)化療或放療

3、，病灶均為單發(fā)。二、實(shí)驗(yàn)方法1、RTPCR檢測(cè)組織勻漿后以TRIzol試劑提取細(xì)胞總RNA，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)將其轉(zhuǎn)化為cDNA：以cDNA為模板，在反應(yīng)體系中加入CMet或整合素0t5及pl引物，以pactin為內(nèi)對(duì)照，進(jìn)行PCR擴(kuò)增；PCR產(chǎn)物經(jīng)15％瓊脂糖凝膠電泳后分析圖像，計(jì)算目的基因相對(duì)表達(dá)量。2、Westernblot檢測(cè)組織加入裂解液，勻漿后離心，取上清檢測(cè)蛋白濃度，并將各樣本蛋白濃度調(diào)整一致。每孔加樣50pg，行SDS聚丙烯