犬埃立克體病診斷、治療的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過(guò)人工接種埃立克體的方法使比格犬感染埃立克體病原，記錄并分析實(shí)驗(yàn)犬的臨床表現(xiàn)、血液涂片中的病原學(xué)特征、血液、脾的PCR檢測(cè)和測(cè)序結(jié)果、血液生化和血液生理變化、病理學(xué)變化以及鹽酸多西環(huán)素治療后的各項(xiàng)指標(biāo)變化，為我國(guó)犬埃立克體病臨床和實(shí)驗(yàn)室診斷以及治療提供參考。 方法： ①將感染我國(guó)犬埃立克體病原的病犬血通過(guò)靜脈注射的方法接種健康的比格犬； ②記錄接種后比格犬的體溫、精神狀況、便、尿、咳嗽、嘔吐、體表出血斑點(diǎn)

2、等臨床癥狀； ③采取發(fā)熱后的病犬血做血液涂片，進(jìn)行姬姆薩染色，并在光鏡下對(duì)血細(xì)胞中的埃立克體病原包涵體進(jìn)行觀察；采取發(fā)熱后病犬血液做電鏡標(biāo)本，并在透射電鏡下對(duì)包涵體內(nèi)的病原進(jìn)行觀察； ④采用PCR的方法對(duì)發(fā)病后比格犬血液進(jìn)行了檢測(cè)并對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行了提純和測(cè)序； ⑤采用全自動(dòng)生化儀和血球計(jì)數(shù)儀，測(cè)定并統(tǒng)計(jì)分析發(fā)病前后比格犬血液生理生化指標(biāo)的變化； ⑥采取發(fā)病后未經(jīng)治療而死亡的2條病犬臟器的樣本，常規(guī)方法制

3、作組織病理切片，H．E．染色，并進(jìn)行顯微鏡拍照觀察； ⑦采用鹽酸多西環(huán)素口服治療的方法治療4條發(fā)病犬，對(duì)治療前后比格犬各項(xiàng)生理生化指標(biāo)進(jìn)行比較，并對(duì)治療效果進(jìn)行評(píng)估。 結(jié)果： ①臨床癥狀：比格犬感染埃立克體病的潛伏期為5-19天，臨床癥狀主要表現(xiàn)為急性發(fā)熱、精神沉郁、食欲時(shí)好時(shí)壞直至廢絕、體重急劇減輕、眼結(jié)膜逐漸蒼白、出血、個(gè)別病犬出現(xiàn)程度不同的腹瀉帶鮮紅血絲和暗紅色血液、血尿、咳嗽和嘔吐癥狀。未經(jīng)治療的病犬瀕死

4、期十分消瘦，全身多處繼發(fā)感染，并分別于發(fā)病后第27和35天出現(xiàn)衰竭表現(xiàn)； ②病原觀察：發(fā)病后的比格犬的血液涂片的光鏡觀察可見(jiàn)到埃立克體包涵體，單核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和血小板中的埃立克體包涵體被染成紫色；血液標(biāo)本的電鏡觀察發(fā)現(xiàn)單核細(xì)胞和血小板包涵體內(nèi)有多個(gè)病原體； ③ PCR檢測(cè)和測(cè)序：六條比格犬在發(fā)病后用埃立克體屬特異性引物做PCR檢測(cè)結(jié)果都為陽(yáng)性，兩條未經(jīng)治療而死亡的病犬的脾臟組織PCR檢測(cè)結(jié)果也為陽(yáng)性；測(cè)序結(jié)果表明，一份目

5、的DNA與犬埃立克體Gzh982株16SrRNA基因序列的相似性為98％，另一份目的DNA與犬埃立克體Gzh981株16SrRNA基因序列的相似性為99％； ④血液生理生化變化：血液生理生化：血常規(guī)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)感染后RBC、WBC、HGB、HCT、PLT、MPV、LYM、MONO和RDW顯著降低(P<0.05)，其余指標(biāo)均無(wú)顯著性差異。血生化檢測(cè)發(fā)現(xiàn)感染后ALT并OAST顯著升高(P<0.05)，ALB極顯著降低(P<0.05)，其

6、余指標(biāo)變化不顯著。 ⑤病理組織學(xué)觀察：剖檢見(jiàn)主要器官和皮下出血、淤血，脾、肝極度腫脹，肺出血明顯；病理組織學(xué)變化的主要特征是淋巴結(jié)的嚴(yán)重水腫，脾、肝、肺和腎的血管內(nèi)及血管周?chē)嬖跐{細(xì)胞和淋巴細(xì)胞灶性增生和膀胱固有層炎性細(xì)胞小灶狀浸潤(rùn)等； ⑥治療試驗(yàn)：4條投服鹽酸強(qiáng)力霉素的實(shí)驗(yàn)犬于治療后第2天，體溫開(kāi)始下降，臨床癥狀有所緩解；第4天，體溫降至正常，食欲、精神明顯好轉(zhuǎn)；治療結(jié)束后15天，姬姆撒染色的血液涂片的單核細(xì)胞和血小板