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文檔簡介
1、侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最重要也是最本質(zhì)的生物學(xué)特征,是引起惡性腫瘤患者預(yù)后不良和死亡的主要原因.惡性黑素瘤(malignant melanoma,MM),簡稱惡黑,是一種高度惡性的黑素細(xì)胞性腫瘤.稱之具有"高度惡性"是因惡黑在臨床上具有起病隱匿、發(fā)展迅速、容易轉(zhuǎn)移、預(yù)后很差、死亡率高的特點.惡黑是一種相對常見的皮膚惡性腫瘤.據(jù)統(tǒng)計,繼鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌之后惡黑的發(fā)病率居皮膚惡性腫瘤的第三位,占6.8﹪~20﹪.目前,世界范圍內(nèi)惡黑的發(fā)
2、病形勢十分嚴(yán)峻,控制和降低其發(fā)病率的任務(wù)十分艱巨.因此,需要借助現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)對惡性黑素瘤的病因?qū)W、病理學(xué)進(jìn)行深入研究,以期為臨床醫(yī)生提供在惡性黑素瘤患者在轉(zhuǎn)移的癥狀前期就能夠及時發(fā)現(xiàn)病變和做出診斷的依據(jù),并指導(dǎo)臨床醫(yī)生采取針對性的治療措施. 目前的分子生物學(xué)研究表明:許多基因活性改變及其表達(dá)產(chǎn)物在腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、轉(zhuǎn)移和預(yù)后等一系列病理過程中發(fā)揮著重要作用.通過cDNA文庫基因表達(dá)系列分析(serial analysis of
3、gene expression,SAGE)篩選出的S100A4蛋白就是一個與惡性腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移等病理過程密切相關(guān)的重要因子<'[1]>.為了進(jìn)一步闡明惡性黑素瘤的發(fā)生和侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制,采集惡性黑素瘤、黑素細(xì)胞痣及正常皮膚組織標(biāo)本,采用免疫組織化學(xué)方法檢測S100h4蛋白、上皮鈣粘素(E-cadherin,E-cad)和乙酰肝素酶在惡性黑素瘤的表達(dá)水平.為惡性黑素瘤的發(fā)生和侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制提供理論依據(jù)并為腫瘤的預(yù)防和治療提供新的途徑.選自鄭
4、州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科1995-2005年的石蠟包埋標(biāo)本75例.其中正常皮膚組織(正常對照組為非腫瘤患者的手術(shù)活檢標(biāo)本)15例,黑素細(xì)胞痣30例,其中惡性黑素瘤30例(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性20例,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性10例,臨床分級Ⅰ級3例,Ⅱ級1例,Ⅲ級4例,Ⅳ級10例,Ⅴ級12例).用正常皮膚組織作對照,分別使用S100A4兔抗人多克隆抗體、E-cad鼠抗人單克隆抗體、乙酰肝素酶兔抗人多克隆抗體進(jìn)行免疫組化SP法染色,檢測S100A4、E-c
5、ad、乙酰肝素酶在正常皮膚組織、黑素細(xì)胞痣和惡性黑素瘤中的表達(dá)水平及相互關(guān)系.所測數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS10.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析.統(tǒng)計學(xué)分析采用x<'2>檢驗及相關(guān)性分析,以P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義. 結(jié)果 1.S100A4在正常皮膚組織中不表達(dá);黑素細(xì)胞痣中S1OOA4的表達(dá)率為13.33﹪(4/30);在惡性黑素瘤組織中S100A4的表達(dá)率為66.67﹪(20/30),表達(dá)主要位于細(xì)胞漿內(nèi),少數(shù)位于胞膜,陽性細(xì)胞以局灶分
6、布為主;惡性黑素瘤皮損S100A4蛋白的陽性表達(dá)率與黑素細(xì)胞痣、與正常對照組相比,均有顯著性差異(x<,1><'2>=17.778,P=0.000;x<,2><'2>=18.000,P=0.000). 2.上皮鈣粘素(E-cad)在正常皮膚組織表達(dá)率為100﹪(15/15):黑素細(xì)胞痣中上皮鈣粘素的表達(dá)率為83.3﹪(25/30);在惡性黑素瘤組織中表達(dá)率為43.33﹪(13/30);惡性黑素瘤皮損上皮鈣粘素蛋白的陽性表達(dá)率與黑
7、素細(xì)胞痣、與正常對照組相比,均有顯著性差異(x<,1><'2>=10.335,P=0.001;x<,2><'2>=13.661,P=0.000). 3.乙酰肝素酶在正常皮膚組織皮脂腺腺體細(xì)胞中表達(dá),其余細(xì)胞中不表達(dá);黑素細(xì)胞痣中乙酰肝素酶的表達(dá)率為6.67﹪(2/30);在惡性黑素瘤組織中乙酰肝素酶表達(dá)主要位于細(xì)胞漿內(nèi),少數(shù)位于胞膜,陽性細(xì)胞以局灶分布為主,在皮脂腺腺體細(xì)胞中亦有表達(dá),在惡性黑素瘤組織中乙酰肝素酶的表達(dá)率為63.
8、33﹪(19/30);惡性黑素瘤皮損乙酰肝素酶蛋白的陽性表達(dá)率與黑素細(xì)胞痣、與正常對照組相比,均有顯著性差異(x<,1><'2>=21.172,P=0.000;x<,2><'2>=16.442,P=0.000). 4.S100A4在惡性黑素瘤組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05);上皮鈣粘素在惡性黑素瘤組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05);乙酰肝素酶在惡性黑素瘤組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05).三者在惡
9、性黑素瘤組織中的表達(dá)都與臨床分級有關(guān)(P<0.05). 5.S100A4蛋白和E-cad、乙酰肝素酶在惡性黑素瘤組織中的表達(dá)均有相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)分別為r-0.523,r=0.506,P<0.05);E-cad和乙酰肝素酶在惡性黑素瘤組織中的表達(dá)亦有相關(guān)性(r-0.451.P<0.05). 小結(jié):1.S100A4在正常皮膚組織中不表達(dá),在惡性黑素瘤組織中高表達(dá);與惡性黑素瘤的臨床分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),提示S100A4與惡性
10、黑素瘤發(fā)生發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移有關(guān). 2.E-cad與惡性黑素瘤的臨床分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),提示E-cad的低表達(dá)或缺失與惡性黑素瘤的分化和轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系,有望成為判斷黑素瘤惡性程度的重要指標(biāo). 3.乙酰肝素酶正常皮膚組織中不表達(dá),在惡性黑素瘤組織中高表達(dá);與惡性黑素瘤的臨床分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),提示乙酰肝素酶與惡性黑素瘤發(fā)生發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移有關(guān). 4.S100A4和乙酰肝素酶在正常皮膚組織中不表達(dá),在惡性黑素瘤組
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