蒙藥紅花干預(yù)大鼠肝癌AFP和P53、HGF基因表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過(guò)建立二乙基亞硝胺（diethylnitrosamine，DEN）誘發(fā)大鼠肝癌模型，檢測(cè)血清AFP及癌組織內(nèi)P53、HGF基因表達(dá)，研究蒙藥紅花對(duì)大鼠肝癌的抑制作用的可能機(jī)制。
　　方法:
　　1、將100只大鼠隨機(jī)均分為模型組、對(duì)照組、蒙藥紅花組3組。利用DEN建立大鼠肝癌模型。分別連續(xù)給藥，蒙藥紅花組每日給予蒙藥湯劑灌胃10ml/kg，其中含生藥1.5g/mL，每日一次;每組隨機(jī)在22、24、26、28周取樣處死

2、，檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。
　　2、利用AFP檢測(cè)試劑盒對(duì)第22、24、26、28周不同時(shí)間點(diǎn)血清進(jìn)行AFP指標(biāo)檢測(cè)，觀察其在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的變化。
　　3、采用光學(xué)顯微鏡對(duì)第22、24、26、28周不同時(shí)間點(diǎn)大鼠肝臟組織進(jìn)行觀察。
　　4、采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中p53及HGF基因mRNA的轉(zhuǎn)錄水平。
　　5、用于SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行分析，組間樣品進(jìn)行t檢驗(yàn)，p＜

3、0.01時(shí)說(shuō)明有極顯著性差異，p＜0.05時(shí)說(shuō)明有顯著性差異，兩者均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、肝臟組織形態(tài)學(xué)觀察:空白組大鼠肝臟光滑，質(zhì)地十分柔軟，顏色為鮮紅色。模型組肝臟為紫紅色或棕黃色，質(zhì)地硬，肝包膜破壞，形成的結(jié)節(jié)互相融合在一起，突出到肝臟表面，形成了肝癌的包塊，同時(shí)與肝臟周?chē)鞴僬尺B在一起。蒙藥紅花組大鼠肝臟形態(tài)介于兩者之間。
　　2、模型組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中AFP水平變化不大，基本維持在高水平;而紅花

4、組存整個(gè)給藥過(guò)程中AFP水平明顯降低，但均高于空白組。
　　3、RT-PCR數(shù)據(jù)以各組瓊脂糖凝膠電泳條帶灰度值來(lái)表示，模型組P53基因轉(zhuǎn)錄水平明顯高于空白組P53基因轉(zhuǎn)錄水平，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01);在同一時(shí)刻點(diǎn)，蒙藥紅花組P53基因轉(zhuǎn)錄水平明顯高于空白組，低于模型組，且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);在整個(gè)給藥過(guò)程中，蒙藥紅花組P53基因轉(zhuǎn)錄水平呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。