蒙藥紅花干預大鼠肝癌AFP和P53、HGF基因表達的實驗研究.pdf

1、目的:通過建立二乙基亞硝胺（diethylnitrosamine，DEN）誘發(fā)大鼠肝癌模型，檢測血清AFP及癌組織內(nèi)P53、HGF基因表達，研究蒙藥紅花對大鼠肝癌的抑制作用的可能機制。
　　方法:
　　1、將100只大鼠隨機均分為模型組、對照組、蒙藥紅花組3組。利用DEN建立大鼠肝癌模型。分別連續(xù)給藥，蒙藥紅花組每日給予蒙藥湯劑灌胃10ml/kg，其中含生藥1.5g/mL，每日一次;每組隨機在22、24、26、28周取樣處死

2、，檢測各項指標。
　　2、利用AFP檢測試劑盒對第22、24、26、28周不同時間點血清進行AFP指標檢測，觀察其在實驗過程中的變化。
　　3、采用光學顯微鏡對第22、24、26、28周不同時間點大鼠肝臟組織進行觀察。
　　4、采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈式反應(RT-PCR)法檢測實驗過程中p53及HGF基因mRNA的轉(zhuǎn)錄水平。
　　5、用于SPSS18.0統(tǒng)計學軟件對實驗所得的數(shù)據(jù)結(jié)果進行分析，組間樣品進行t檢驗，p＜

3、0.01時說明有極顯著性差異，p＜0.05時說明有顯著性差異，兩者均有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:
　　1、肝臟組織形態(tài)學觀察:空白組大鼠肝臟光滑，質(zhì)地十分柔軟，顏色為鮮紅色。模型組肝臟為紫紅色或棕黃色，質(zhì)地硬，肝包膜破壞，形成的結(jié)節(jié)互相融合在一起，突出到肝臟表面，形成了肝癌的包塊，同時與肝臟周圍器官粘連在一起。蒙藥紅花組大鼠肝臟形態(tài)介于兩者之間。
　　2、模型組在整個實驗過程中AFP水平變化不大，基本維持在高水平;而紅花

4、組存整個給藥過程中AFP水平明顯降低，但均高于空白組。
　　3、RT-PCR數(shù)據(jù)以各組瓊脂糖凝膠電泳條帶灰度值來表示，模型組P53基因轉(zhuǎn)錄水平明顯高于空白組P53基因轉(zhuǎn)錄水平，且差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.01);在同一時刻點，蒙藥紅花組P53基因轉(zhuǎn)錄水平明顯高于空白組，低于模型組，且差異均具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05);在整個給藥過程中，蒙藥紅花組P53基因轉(zhuǎn)錄水平呈現(xiàn)下降趨勢，且差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。