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文檔簡介
1、 目的：
研究細胞因子hTGF-β1對小鼠的淋巴細胞生物學行為的影響，以及hTGF-β1基因修飾的大鼠軟骨細胞生物學功能的改變，初步探討其作用機制。為尋找理想的軟骨組織工程種子細胞、并開發(fā)新的異種移植排斥治療和預防方法奠定基礎。
方法：
將hTGF-β1細胞因子作用于小鼠淋巴細胞，利用熒光抗體標記及Annexin V和7-AAD雙染色，結合流式細胞術檢測對多克隆刺激劑作用下的淋巴細胞CD69及CD25表達
2、水平及Annexin V~+/7-AAD~-細胞比例，判斷T細胞的活化與凋亡水平；~3H-TdR同位素摻入法檢測淋巴細胞的增殖情況。另一方面，利用優(yōu)化的電穿孔轉(zhuǎn)染技術將pEGFP-TGF-β1-N1表達載體導入大鼠原代培養(yǎng)的軟骨細胞中，流式細胞儀檢測熒光表達率，熒光顯微鏡觀察熒光表達情況，同位素摻入法檢測軟骨細胞生物學功能。
結果：
小同劑量hTGF-β1對于多克隆刺激劑作用的小鼠T細胞的活化較對照組均無明顯抑制作用
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