六價鉻致癌機制及綠茶拮抗作用的研究.pdf

1、目的：Cr(Ⅵ)在工業(yè)上應用極廣，已被國際癌癥研究所(IARC)證實是一種強致癌劑，可導致職業(yè)性肺癌，但其致癌機制還不是很明確。近10余年來，分子生物學飛速發(fā)展，腫瘤發(fā)生機制的認識亦隨之不斷深入。研究顯示：癌基因的激活和抑癌基因的失活都是腫瘤發(fā)生的分子基礎(chǔ)，目前已在多種人類腫瘤中發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象。但有關(guān)Cr(Ⅵ)對細胞內(nèi)癌基因和抑癌基因水平的影響，國內(nèi)至今報道很少。為了探討Cr(Ⅵ)化合物的致癌機制及綠茶對其的拮抗效應，以人胚肺成纖維細胞(H

2、EL)為體外培養(yǎng)實驗模型，研究了重鉻酸鉀在體外誘導正常人胚肺細胞內(nèi)癌基因及抑癌基因表達的影響，進一步揭示Cr(Ⅵ)的致癌機制，同時研究了綠茶對Cr(Ⅵ)的拮抗作用及其作用機制。 方法：HEL細胞為受試對象，通過MTT試驗檢驗Cr(Ⅵ)、綠茶對HEL細胞存活率的影響。Cr(Ⅵ)濃度為0、0.625、1.25、2.50、5.0、10.0、20.0μmol/L；綠茶終濃度為1mg/ml，處理時間為24h。普通光學顯微鏡觀察HEL細胞一

3、般形態(tài)；吖啶橙染色法觀察HEL細胞胞核的形態(tài)學改變。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應法(RT-PCR)測定5.0μ.mol/LCr(Ⅵ)、10.0μmol/LCr(Ⅵ)、5.0μmol/LCr(Ⅵ)+綠茶、10.0μmol/LCr(Ⅵ)+綠茶各組HEL細胞內(nèi)p53、bcl-2轉(zhuǎn)錄水平。免疫組化法檢測P53、Bcl-2蛋白水平及蛋白定位。 結(jié)論：Cr(Ⅵ)可抑制HEL細胞增殖，引起細胞形態(tài)改變；Cr(Ⅵ)可增加p53、bcl-2轉(zhuǎn)錄活性及誘導P