烏司他丁對呼吸心跳驟停大鼠復(fù)蘇早期腦組織谷氨酸代謝的影響.pdf

1、目的:通過制備呼吸心跳驟停大鼠即刻復(fù)蘇模型(CPR模型),觀察烏司他丁對CPR模型大鼠海馬組織超微結(jié)構(gòu)的影響,探討烏司他丁對CPR模型大鼠即刻復(fù)蘇早期海馬組織中谷氨酸(Glu)及其相關(guān)通路上的N-甲基-D天冬氨酸受體(NMDAR)、神經(jīng)細(xì)胞膜電位、鈣離子(Ca2+)和海馬組織病理學(xué)改變的影響及作用。
　　方法:成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)對照組(S組)、生理鹽水復(fù)蘇組(NS組)和烏司他丁復(fù)蘇組(UTI組)。采用窒息法致NS組和U

2、TI組大鼠心臟驟停(CA),繼而進(jìn)行心肺復(fù)蘇(CPR)。UTI組于自主循環(huán)恢復(fù)(ROSC)后2min內(nèi)經(jīng)左頸總動脈推注注射用UTI(105u/kg);NS組于ROSC2min內(nèi)經(jīng)左頸總動脈推注等量NS。S組僅行麻醉、氣管切開和血管穿刺。UTI組和NS組于ROSC0.5h、1h、2h,S組于氣管切開后0.5h、1h、2h快速斷頭取右側(cè)腦海馬組織。采用AQC柱前衍生高效液相熒光檢測(RP-HPLC-熒光法)法測定大鼠海馬組織中Glu含量;免

3、疫組織化學(xué)法觀察各組NMDAR的表達(dá);流式細(xì)胞儀(FMC法)測定神經(jīng)細(xì)胞膜電位及Ca2+熒光強(qiáng)度;電鏡下觀察海馬組織超微結(jié)構(gòu)變化及光鏡下觀察海馬組織的病理學(xué)改變。
　　結(jié)果:1、RP-HPLC-熒光法檢測Glu含量:(1)ROSC0.5h各組動物海馬組織中Glu含量分別為S組(587.31±168.62)ug/g、NS組(907.91±54.22)ug/g和UTI組(763.74±89.04)ug/g(UTIvs.S,P<0.05

4、,NSvs.S,P<0.01,UTIvs.NS,P<0.05);(2)ROSC1h各組Glu含量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,S組(544.78±58.90)ug/g、NS組(684.06±61.54)ug/g和UTI組(680.63±126.81)ug/g(均P>0.05);(3)ROSC2h各組Glu含量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,S組(493.33±108.84)ug/g、NS組(618.23±209.54)ug/g和UTI組(551.04±84.24)ug/

5、g(均P>0.05)。
　　2、NMDAR免疫組化檢測示:(1)ROSC0.5h~2hS組細(xì)胞膜NMDAR呈弱陽性表達(dá),UTI組細(xì)胞膜NMDAR呈陽性表達(dá),NS組細(xì)胞膜NMDAR呈強(qiáng)陽性表達(dá),UTI組和NS組AOD值均大于S組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01)。(2)ROSC0.5h~2hUTI組細(xì)胞膜NMDAR陽性表達(dá)弱于NS組,AOD值均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(UTIvs.NS,P<0.05)。
　　3、FMC法檢測細(xì)胞膜電位

6、熒光強(qiáng)度:(1)ROSC0.5h各組動物海馬組織中膜電位熒光強(qiáng)度分別為S組(132.24±64.16)、NS組(257.48±92.24)和UTI組(222.32±110.19)(UTIvs.S,P=0.139,NSvs.S,P<0.05,UTIvs.NS,P=0.521);(2)ROSC1h~2h,NS組和UTI組膜電位熒光強(qiáng)度大于S組,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05);(3)ROSC1h~2h,UTI組膜電位熒光強(qiáng)度小于NS組,差

7、異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為UTIvs.NS,P=0.272,UTIvs.NS,P=0.409)。
　　4、FMC法檢測細(xì)胞Ca2+熒光強(qiáng)度:(1)ROSC0.5hNS組和UTI組Ca2+熒光強(qiáng)度大于S組,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05);(2)ROSC1hCa2+熒光強(qiáng)度分別為S組(84.18±26.93)、NS組(166.22±34.16)和UTI組(96.93±35.29)(UTIvs.S,P=0.53,NSvs.S,P<0.01

8、,UTIvs.NS,P<0.01);(3)ROSC2h各組Ca2+熒光強(qiáng)度分別為S組(69.38±11.33)、NS組(149.72±54.54)和UTI組(142.72±44.45)(UTIvs.S,P<0.05,NSvs.S,P<0.01,UTIvs.NS,P=0.780)。
　　5、病理學(xué)觀察:UTI組透射電鏡下海馬組織超微結(jié)構(gòu)變化、尼氏體染色變化及光鏡下海馬組織病理學(xué)損傷均輕于NS組。
　　結(jié)論:在大鼠即刻CPR后早