根際細(xì)菌對(duì)土壤線蟲的反捕食作用及對(duì)根結(jié)線蟲的防治.pdf

1、線蟲是種類最多的動(dòng)物之一，在土壤、水源及生物體內(nèi)等環(huán)境中廣泛分布。土壤中的線蟲主要有自由生線蟲和植物寄生線蟲兩種，在植物根際都尤為密集，并因此與根際細(xì)菌有著復(fù)雜多樣的交互關(guān)系。生物菌肥是近年來研究的熱點(diǎn)，利用植物根際細(xì)菌為主體的生物肥料具有多效、環(huán)保、可持續(xù)等優(yōu)點(diǎn)，但在實(shí)際應(yīng)用中遇到許多問題。自由生線蟲捕食細(xì)菌，往往造成生防細(xì)菌的損耗，影響菌肥效果，但有時(shí)也會(huì)幫助傳播菌株，擴(kuò)大菌株的分布范圍；而植物線蟲則是危害農(nóng)作物健康的病原線蟲。國(guó)外

2、對(duì)自由生線蟲與細(xì)菌的關(guān)系已有不少研究，而國(guó)內(nèi)報(bào)道較為稀缺；而利用根際細(xì)菌防治植物線蟲的研究國(guó)內(nèi)外均已有不少成果。然而不論是國(guó)內(nèi)還是國(guó)外，將該兩項(xiàng)研究相結(jié)合的報(bào)道都很少。
　　本課題從番茄根際土壤中分離得到14株細(xì)菌，將實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有菌株與其對(duì)比，得到兩株對(duì)秀麗線蟲具有一定反捕食能力的菌株，分別為橘黃假單胞菌JD37和熒光假單胞菌 P13。兩株細(xì)菌在緩慢殺線實(shí)驗(yàn)中對(duì)秀麗線蟲的致死率分別達(dá)到26.12％和18.66%。與大腸桿菌 OP50

3、相比，秀麗線蟲排斥JD37菌株，且偏好P13菌株，選擇性系數(shù)分別為-0.59和0.47。經(jīng)過7天的共同培養(yǎng)，JD37組線蟲大量死亡且繁殖率下降，P13組線蟲行動(dòng)力略有下降，繁殖力幾乎不受影響。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)菌株活力對(duì)其反捕食能力具有一定影響，因此推測(cè)兩株細(xì)菌的反捕食能力作用源于次級(jí)代謝產(chǎn)物，并對(duì)現(xiàn)已知主要有效產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)定。苦味酸試紙?jiān)囼?yàn)顯示，熒光假單胞菌P13具有產(chǎn)生HCN的能力，JD37則無法產(chǎn)生HCN；而PCR克隆結(jié)果顯示JD37、P13

4、兩株細(xì)菌均無法產(chǎn)生2,4-DAPG。分子實(shí)驗(yàn)表明JD37菌株不具有產(chǎn)生任何一種已知次級(jí)代謝產(chǎn)物的能力。為將兩株細(xì)菌運(yùn)用于根結(jié)線蟲防治，本課題首先對(duì)河南省新鄉(xiāng)市延津縣番茄線蟲病發(fā)地土壤進(jìn)行理化性質(zhì)檢測(cè)，確定土樣呈中性，可溶性鹽濃度偏高，土質(zhì)粗略判斷為壤土或粘壤土。其次，灌溉實(shí)驗(yàn)得出，根結(jié)線蟲在含水量為15mL/100g土/周以下時(shí)易侵染番茄，且當(dāng)灌水量大于該數(shù)值，番茄植株本身的生長(zhǎng)也會(huì)受到影響。根據(jù)以上結(jié)論設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)JD37、P13菌

5、劑對(duì)根結(jié)線蟲的侵染均有一定的抑制效果，其中 P13抑制效果較JD37更佳，而JD37能更好地促進(jìn)番茄生長(zhǎng)。P13和JD37兩種菌劑與對(duì)照組相比分別使根結(jié)數(shù)減少49.10%和43.53%，番茄植株莖生長(zhǎng)量分別比對(duì)照組高出26.41%和30.26%。
　　以上結(jié)果表明，JD37、P13兩株生防細(xì)菌在土壤自由生線蟲的捕食壓力下演化出不同的應(yīng)對(duì)機(jī)理，其中JD37菌株能更為有效地抵抗捕食，且對(duì)植物寄生線蟲也有一定的拮抗能力，并能夠更好地幫助