妊高征患者胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡基因表達譜的研究.pdf

1、目的：分析妊娠高血壓綜合征(妊高征)患者胎盤組織中的滋養(yǎng)細胞凋亡特征，探討胎盤組織滋養(yǎng)細胞凋亡現(xiàn)象與妊高征病因及病理生理學(xué)之間的關(guān)系。 方法：采用電鏡掃描、原位細胞凋亡標(biāo)記(TUNEL)、及流式細胞儀等技術(shù)，獲得妊高征患者胎盤組織中的滋養(yǎng)細胞凋亡證據(jù)。 結(jié)果：(1)電鏡下，妊高征患者胎盤組織滋養(yǎng)細胞的超微結(jié)構(gòu)均存在細胞核形態(tài)不規(guī)則、核膜固縮、異染色質(zhì)異常分布、細胞質(zhì)內(nèi)線粒體基質(zhì)變深、嵴模糊或排列紊亂、滋養(yǎng)細胞空泡化等凋亡

2、形態(tài)學(xué)變化； (2)TUNEL法檢測發(fā)現(xiàn)，妊高征患者胎盤組織中存在較多凋亡滋養(yǎng)細胞，而正常胎盤組織中少見凋亡滋養(yǎng)細胞；(3)正常胎盤組織流式細胞檢測圖中凋亡細胞峰(Apo峰)不明顯，妊高征患者胎盤組織的流式細胞檢測圖中均存在較明顯的亞二倍體DNA合量細胞峰(Apo峰)。 結(jié)論：妊高征患者胎盤組織存在滋養(yǎng)細胞凋亡特征，可能與妊高征的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。 目的：采用基因芯片技術(shù)篩查妊高征胎盤組織滋養(yǎng)細胞凋亡基因的差異表達，探討

3、滋養(yǎng)細胞凋亡與妊高征發(fā)病的關(guān)系。 方法：妊高征患者20例為妊高征組，正常孕婦10例為對照組。采用上海博星公司生產(chǎn)的基因芯片進行凋亡基因表達譜的篩查。判斷基因差異表達的標(biāo)準(zhǔn)為：(1)cy5(妊高征組) /Cy3(對照組)的自然對數(shù)絕對值>0.69，cy3與cy5的信號相差2倍以上；(2) cy3或cy5、cy3和cy5的信號值其中之一必須>800。 結(jié)果：基因芯片篩查有差異表達的凋亡相關(guān)基因10個，占基因芯片篩查凋亡基因總

4、數(shù)的5％。妊高征胎盤組織中的凋亡基因表達均明顯下調(diào)，即cy5與cy3的比值<1。其中包括具有明顯抗凋亡作用的SFRP2、IAP2、DHCY24及ATPIA1基因。 結(jié)論：在妊高征胎盤滋養(yǎng)細胞存在顯著凋亡現(xiàn)象的形態(tài)學(xué)證據(jù)支持下，妊高征患者胎盤中具有抗凋亡作用的基因表達明顯下調(diào)，將可能導(dǎo)致胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡，從而導(dǎo)致妊高征發(fā)生發(fā)展。 目的：實驗驗證部分差異表達基因在妊高征患者胎盤組織中的表達水平，論證芯片雜交實驗結(jié)果的可靠性

5、和可信度。 方法：提取妊高征患者及正常胎盤組織總RNA，采用RT-PCR、Western Blot技術(shù)檢測部分差異表達基因在妊高征患者胎盤組織中的表達水乎。 結(jié)果：驗證的10個差異表達基因，在妊高征患者胎盤組織中的表達水平均明顯低于正常對照。 結(jié)論：所選驗證基因的表達趨勢與在基因表達譜中的變化一致，提示本研究中基因表達譜的實驗結(jié)果具有較好的可信度和可靠性，深入分析差異表達基因與妊高征之間的關(guān)系將可能為闡明妊高征的