子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)層細胞差異表達蛋白的初步研究.pdf

1、子癇前期是妊娠期特有的疾病，發(fā)病率5﹪～8﹪，是導致孕產(chǎn)婦及圍生兒死亡率增高的主要原因之一。本病的特點是妊娠20周后出現(xiàn)高血壓、蛋白尿、水腫等臨床表現(xiàn)，導致全身性、多系統(tǒng)功能紊亂，嚴重影響母嬰的健康。子癇前期的確切病因及發(fā)病機制尚未闡明，使該病在診療、預防上產(chǎn)生了一定困難。以往的研究發(fā)現(xiàn)，子癇前期發(fā)生與滋養(yǎng)層細胞功能異常有關(guān)，滋養(yǎng)層細胞功能異常包括侵襲能力低下、粘附因子和細胞因子表達異常、免疫功能紊亂、細胞過度凋亡、血管活性物質(zhì)分泌失常

2、等。 目的分析、鑒定子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)層細胞差異表達蛋白，探討差異蛋白與疾病發(fā)生的可能關(guān)系，為深入理解引發(fā)子癇前期的復雜分子機制奠定基礎(chǔ)。 方法分離、純化、鑒定5例正常妊娠婦女和5例子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)層細胞，超聲后提取細胞總蛋白。雙向電泳技術(shù)對總蛋白進行分離，銀染顯色，獲得蛋白質(zhì)圖譜。用PDQuest軟件進行圖像分析，尋找差異蛋白。再利用質(zhì)譜技術(shù)對差異蛋白進行分析，得到蛋白的肽質(zhì)量指紋譜，上網(wǎng)比對檢索，得到蛋白的名稱

3、。 結(jié)果正常妊娠及子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)層細胞總蛋白雙向電泳各重復3次，得到重復性好的蛋白圖譜。PDQuest軟件進行圖像分析發(fā)現(xiàn)，子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)層細胞有34個蛋白點在質(zhì)或量上存在表達增高或減少(未給出)，選擇其中9個點進行質(zhì)譜鑒定，得到蛋白質(zhì)的肽質(zhì)量指紋譜，發(fā)現(xiàn)有三個蛋白點為同一種蛋白。在鑒定出的7種蛋白質(zhì)中，有4種蛋白：蛋白質(zhì)二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)固有蛋白(ERp44)，二氫硫辛酸脫氫酶，TIM-21樣蛋白