EMMPRIN在子癇前期胎盤的表達(dá)及其對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞分泌MMPs調(diào)控的研究.pdf

1、前言：妊娠期高血壓疾病是嚴(yán)重影響母嬰健康的妊娠期特有疾病，是孕產(chǎn)婦和圍生兒病率和死亡率的主要原因。該病以全身小動(dòng)脈痙攣為病理生理特征，以高血壓、水腫、蛋白尿?yàn)橹饕R床表現(xiàn)。妊娠期高血壓疾病的發(fā)病機(jī)制不清，其發(fā)病包括多個(gè)環(huán)節(jié)，涉及多個(gè)器官，目前比較公認(rèn)的過程為：多基因的遺傳背景增加發(fā)病的易感性，胎兒和母體之間免疫平衡失調(diào)，導(dǎo)致細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤子宮螺旋動(dòng)脈過淺，胎盤血管生理性重鑄障礙，引起胎盤缺血缺氧，釋放一系列小分子毒性物質(zhì)進(jìn)入母體循環(huán)而

2、促使血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，全身小動(dòng)脈痙攣，組織缺血缺氧，致使母體各器官及胎盤損傷。 胎盤形成過程中，滋養(yǎng)層細(xì)胞的浸潤主要發(fā)生在妊娠早期，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞通過粘附、基質(zhì)的溶解和細(xì)胞的遷移完成向母體的侵入。滋養(yǎng)細(xì)胞的浸潤行為受到母胎介面的粘附分子、生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)的調(diào)控，母胎介面基質(zhì)的溶解是侵入過程中的重要環(huán)節(jié)，它掃清了侵入路途中的物理障礙。滋養(yǎng)細(xì)胞通過分泌基質(zhì)金屬蛋白酶降解蛻膜基質(zhì)，它可降解幾乎所有的基質(zhì)成份。在妊娠整

3、個(gè)過程中都有MMPs的參與，在胚胎植入的較早時(shí)期MMP2起主要作用，而MMP9在妊娠中晚期起主要作用。 諸多研究表明，在妊娠期高血壓疾病患者的胎盤和血清中MMPs(主要為MMP9)水平均降低，且表達(dá)量與疾病程度相關(guān)，說明MMPs分泌不足，引起滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤能力下降，胎盤血管形成數(shù)量不足，深度不夠，以至孕晚期影響胎盤血流灌注增加。因而認(rèn)為MMPs的表達(dá)下降在妊娠期高血壓疾病的發(fā)生和發(fā)展中有重要意義。 細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的上述生物學(xué)

4、行為與有高度侵蝕性的腫瘤細(xì)胞相似，這種相同的侵蝕過程也提示其可能存在相同的侵蝕機(jī)制。細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)是近十年發(fā)現(xiàn)的一種跨膜糖蛋白，它是免疫球蛋白家族成員之一，廣泛地存在于人類各種腫瘤細(xì)胞，刺激與腫瘤有關(guān)的成纖維細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞自身的MMPs合成，在惡性腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移中起著重要的作用。 目的：作為MMPs的上調(diào)因子，EMMPRIN在妊娠過程中是否表達(dá)，在子癇前期胎盤中表達(dá)有何特點(diǎn)及對(duì)胎盤部位的MMPs

5、的調(diào)節(jié)尚未見報(bào)道。本研究目的就是對(duì)此問題進(jìn)行解答，以期探討EMMPRIN在正常妊娠和病理妊娠中的作用。 方法：本研究以人不同孕周的絨毛及胎盤為材料，以免疫組化方法研究了EMMPRIN在不同妊娠時(shí)期胎盤中的時(shí)空表達(dá)；以妊娠中晚期胎盤為材料，以同孕周正常胎盤作對(duì)照，用免疫組化、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法檢測EMMPRIN在子癇前期胎盤的表達(dá)；體外無血清培養(yǎng)人絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞，用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測EMMPRIN的表達(dá)部位；以不同劑量的EM

6、MPRIN特異抗體作用于滋養(yǎng)細(xì)胞，用明膠酶譜方法檢測對(duì)MMP2，9分泌的影響。 結(jié)果：EMMPRIN在妊娠早期絨毛、中期和足月胎盤中均有表達(dá)。妊娠早期絨毛表達(dá)部位主要集中在絨毛內(nèi)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞、合體滋養(yǎng)細(xì)胞，細(xì)胞滋養(yǎng)層柱細(xì)胞；在中期和足月胎盤可見已侵入到底蛻膜的絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞。表達(dá)特點(diǎn)變化為：6-9周在絨毛內(nèi)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞、合體滋養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)胞滋養(yǎng)層柱細(xì)胞的表達(dá)隨孕周逐漸下降；在中期和足月胎盤中上述部位趨于穩(wěn)定弱表達(dá)，而中期和足月

7、胎盤中已侵入到底蛻膜的絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞中的表達(dá)逐漸增強(qiáng)。 在從妊娠24周到40周的胎盤中均有EMMPRINmRNA表達(dá)，與同孕周正常胎盤比較EMMPRIN在子癇前期組的表達(dá)明顯減少，兩組比較差異顯著；子癇前期胎盤中EMMPRINmRNA表達(dá)下降，與正常組比較有顯著差異，說明病例組中EMMPRIN的表達(dá)在轉(zhuǎn)錄水平就已經(jīng)被抑制。 體外研究表明，在細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的胞膜上和胞質(zhì)中可見EMMPRIN表達(dá)的陽性顆粒?？笶MMPRIN