脂多糖調(diào)節(jié)細胞因子在細胞滋養(yǎng)細胞的表達及其與子癇前期的關(guān)系.pdf

1、本文研究目的：通過檢測脂多糖對體外無血清條件下培養(yǎng)的細胞滋養(yǎng)細胞表達細胞因子的調(diào)節(jié)作用，探討這些細胞因子與子癇前期的關(guān)系；觀察脂多糖對細胞滋養(yǎng)細胞凋亡的誘導(dǎo)作用，以及腫瘤壞死因子在此過程中的作用。同時，觀察腫瘤壞死因子-α和凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3在子癇前期患者胎盤的表達。在這些基礎(chǔ)上，揭示細胞滋養(yǎng)細胞的天然免疫細胞特性，闡明脂多糖調(diào)節(jié)細胞因子在細胞滋養(yǎng)細胞的表達及其與子癇前期的關(guān)系。 研究方法： 采集早孕絨毛、分離細

2、胞滋養(yǎng)細胞，采用無血清培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。采用人細胞因子抗體芯片觀察脂多糖對細胞滋養(yǎng)細胞表達細胞因子的調(diào)節(jié)作用；采用酶聯(lián)免疫吸附實驗、免疫熒光、激光共聚焦、Hoechst DNA染色、透射電鏡、流式細胞儀、Western blot等技術(shù)觀察脂多糖對細胞滋養(yǎng)細胞凋亡的調(diào)節(jié)作用，以及腫瘤壞死因子-α在此過程中的作用。采用免疫組織化學(xué)方法觀察子癇前期胎盤組織腫瘤壞死因子-α和半胱氨酸蛋白酶．3的表達。 研究結(jié)果： 細胞因子抗體芯片

3、結(jié)果表明，脂多糖對細胞因子在細胞滋養(yǎng)細胞的表達有調(diào)節(jié)作用。脂多糖促進CXC類趨化因子生長基因相關(guān)產(chǎn)物和生長基因相關(guān)-α的表達，抑制CC類趨化因子單核細胞趨化蛋白-2、巨噬細胞炎癥蛋白-1δ和RANTES的表達；脂多糖促進前炎性細胞因子白介素-1β、白介素-6、白介素-12p40p70、干擾素-γ、腫瘤壞死-α和抑瘤素M的表達，抑制抑炎性細胞因子白介素-4和白介素-13的表達，但是促進抑炎性細胞因子白介素-10的表達；脂多糖促進生長因子白

4、介素-2、白介素-7、血管內(nèi)皮細胞生長因子和血小板衍生生長因子的表達，抑制表皮生長因子、白介素-15和血管緊張素原的表達；脂多糖對單核細胞趨化蛋-1、單核細胞趨化蛋-3、巨噬細胞衍化趨化因子、腫瘤壞死因子-β、胰島素樣生長因子-1、單核細胞集落刺激因子、白介素-5、上皮細胞一中性粒細胞活化肽-78、單核細胞因子、粒細胞集落刺激因子、干細胞因子、瘦素、基質(zhì)細胞源性細胞因子-1、1-309、TRAC和TGF-β1的表達沒有影響。 通

5、過對形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)等定性、定量分析表明，脂多糖在體外能夠誘導(dǎo)細胞滋養(yǎng)細胞凋亡，并呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系；ELISA和激光共聚焦研究表明，脂多糖促進體外培養(yǎng)的細胞滋養(yǎng)細胞分泌腫瘤壞死因子，亦呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系；相關(guān)分析表明，腫瘤壞死因子的表達與細胞凋亡指數(shù)正相關(guān)。 對子癇前期患者的研究表明，胎盤組織腫瘤壞死因子和caspase-3的表達明顯高于正常孕婦。 研究結(jié)論： 因為細胞滋養(yǎng)細胞具有天然免疫細胞特性，所以脂多糖能夠調(diào)節(jié)

6、一些與子癇前期的發(fā)生有密切關(guān)系的細胞因子在細胞滋養(yǎng)細胞的表達；脂多糖促進CXC類趨化因子的表達，活化中性粒細胞；促進前炎性細胞因子，抑制抗炎性細胞因子的表達，誘發(fā)和加劇母胎界面和母體全身炎癥；調(diào)節(jié)多種生長因子的表達，抑制細胞滋養(yǎng)細胞的生長，引起Th1/Th2比例失衡。本文首次發(fā)現(xiàn)脂多糖能夠調(diào)節(jié)Oncostatin M、IL-7、IL-13、GRO、和GRO-α在細胞滋養(yǎng)細胞的表達。腫瘤壞死因子-α促進細胞滋養(yǎng)細胞凋亡，在子癇前期的發(fā)病機