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1、目的:通過(guò)體外研究觀察白藜蘆醇對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)表達(dá)細(xì)胞因子IL-6、VCAM-1、TNF-α、MCP-1的干預(yù)作用并探討動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生機(jī)制。
方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)。RT-PCR檢測(cè)其TLR4的mRNA表達(dá)。應(yīng)用LPS(0.01μg/mL、0.1μg/mL、1μg/mL)刺激內(nèi)皮細(xì)胞24h,real-timePCR檢測(cè)細(xì)胞因子IL-6、VCAM-1、TNF-α
2、、MCP-1的mRNA表達(dá)水平,選擇出最佳LPS作用濃度。白藜蘆醇(5μM、15μM、30μM)孵育內(nèi)皮細(xì)胞30min,加入LPS(0.1μg/mL)共同培養(yǎng)24h,real-timePCR檢測(cè)細(xì)胞因子IL-6、VCAM-1、TNF-α、MCP-1的mRNA的表達(dá)水平。
結(jié)果:1.人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)TLR4。2.與正常對(duì)照組相比,三種不同濃度LPS刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞后均引起IL-6和TNF-α的mRNA表達(dá)增加(P<0.05)
3、,低劑量(0.01μg/mL)LPS刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞并不引起VCAM-1、MCP-1的mRNA表達(dá)增加(P>0.05),而中、高劑量組均可引起VCAM-1、MCP-1的mRNA表達(dá)增加(P<0.05)。3.與LPS刺激組相比,三種不同濃度的白藜蘆醇干預(yù)組的IL-6、VCAM-1mRNA的表達(dá)減少(P<0.05),在TNF-α、MCP-1mRNA的表達(dá)中,低劑量白藜蘆醇干預(yù)組與LPS刺激組相比較mRNA的表達(dá)水平無(wú)差異(P>0.05),中
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