小細(xì)胞肺癌血清細(xì)胞因子的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、肺癌為最常見(jiàn)的惡性腫瘤，其中，小細(xì)胞肺癌(SCLC)占肺癌發(fā)病率的20％。SCLC患者初始治療效果較好，但腫瘤容易復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，治療效果并不理想，其總體五年生存率小于5%。肺癌發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)可能與呼吸道局部條件有關(guān)，如炎癥反應(yīng)、環(huán)境因素等。因?yàn)檠装Y對(duì)呼吸道上皮長(zhǎng)期慢性的刺激作用，釋放活性氧、炎癥趨化因子等物質(zhì)而誘發(fā)了肺癌的發(fā)生發(fā)展。比如：現(xiàn)已證實(shí)因吸煙引起的慢性阻塞性肺疾病(COPD)就是肺癌的誘發(fā)因素，同時(shí)也證實(shí)吸煙者和肺癌患者血清以及支氣

2、管肺泡灌洗液細(xì)胞因子水平都會(huì)發(fā)生變化。
　　 腫瘤生物治療面臨的最大難題為腫瘤細(xì)胞的免疫逃避。腫瘤細(xì)胞不僅能通過(guò)減弱或調(diào)變表面抗原改變免疫狀態(tài)，實(shí)現(xiàn)Fas無(wú)功能性表達(dá)或表達(dá)下降以及對(duì)Fas介導(dǎo)的凋亡不敏感等。同時(shí)，腫瘤細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子在介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞免疫逃避及腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移中也起到了重要作用。此外，腫瘤患者免疫防御損傷及免疫功能抑制對(duì)其生存率同樣產(chǎn)生影響。隨著細(xì)胞因子研究的深入，越來(lái)越多與腫瘤相關(guān)的細(xì)胞因子在疾病進(jìn)程中的作用相繼

3、被發(fā)現(xiàn)，通過(guò)評(píng)價(jià)細(xì)胞因子在很多疾病的病理過(guò)程的變化，闡述不同因子的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，有利于通過(guò)認(rèn)識(shí)紊亂的免疫功能而設(shè)計(jì)出新的治療方法，為監(jiān)測(cè)腫瘤的嚴(yán)重程度和治療的有效性發(fā)展新的預(yù)測(cè)參數(shù)及診斷指標(biāo)，同時(shí)也為開(kāi)發(fā)有前景的治療性藥物提供相應(yīng)的理論基礎(chǔ)。
　　 目前，針對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞因子的研究居多，且篩選的指標(biāo)偏少，關(guān)于小細(xì)胞肺癌細(xì)胞因子研究的文獻(xiàn)報(bào)道則更少。現(xiàn)有的細(xì)胞因子檢測(cè)方法有免疫學(xué)檢測(cè)法，包括放射免疫測(cè)定法(RIA)、免疫放

4、射測(cè)定法(IRMA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，以及酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法(ELISPOT)、流式細(xì)胞檢測(cè)方法(FCM)以及包括基因芯片在內(nèi)的分子生物學(xué)方法。傳統(tǒng)的細(xì)胞因子檢測(cè)方法相對(duì)落后，細(xì)胞因子抗體芯片技術(shù)應(yīng)用類似酶聯(lián)免疫反應(yīng)的原理，將特異性細(xì)胞因子抗體按預(yù)定的陣列形式和順序排列在載體芯片上，將待測(cè)的標(biāo)本與之反應(yīng)，對(duì)芯片進(jìn)行掃描，同時(shí)計(jì)算機(jī)軟件對(duì)熒光信號(hào)進(jìn)行分析，即可獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。細(xì)胞因子芯片具有高通量、高特異度、高靈敏度等特點(diǎn)，檢

5、測(cè)范圍廣，結(jié)果可信。
　　 研究目的:
　　 1.檢測(cè)SCLC患者血清中細(xì)胞因子的差異改變，并探討其在SCLC中的診斷價(jià)值。
　　 2.根據(jù)選擇出的差異表達(dá)細(xì)胞因子，探討它們與小細(xì)胞肺癌(SCLC)化療療效及預(yù)后的關(guān)系。
　　 材料與方法:
　　 1.首先使用Reybiotech G6/G7細(xì)胞因子芯片對(duì)4例小細(xì)胞肺癌、4例健康人和4例炎癥患者血清進(jìn)行細(xì)胞因子差異表達(dá)篩查。
　　 2.應(yīng)用

6、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA試劑盒)對(duì)197例SCLC患者、180例正常對(duì)照血清以及97例炎性病變患者血清進(jìn)行驗(yàn)證。
　　 3.使用ELISA法檢測(cè)80例SCLC患者在化療前后人血清中uPAR的表達(dá)，并分析其表達(dá)水平與患者療效及預(yù)后的關(guān)系。
　　 研究結(jié)果:
　　 1.芯片檢測(cè)120種細(xì)胞因子，從有顯著差異的細(xì)胞因子中選出最有研究?jī)r(jià)值的4種進(jìn)行驗(yàn)證，包括尿激酶型纖溶酶原激活劑受體(uPAR)、人瘦素(Leptin)

7、、巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP-a)和巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1 b(MIP-1b)(P<0.05)。
　　 2.采用ELISA法驗(yàn)證上述結(jié)果，SCLC患者血清uPAR較健康人群以及炎癥患者增高(P<0.05)，診斷的敏感度為52.93%，特異度為83.36%。Leptin在無(wú)體重變化SCLC組較健康人群以及炎癥患者增高，診斷的敏感度為50.11%，特異度86.77%；而Leptin在體重下降組較對(duì)照組無(wú)明顯差異。此外，血清MSP-a、MI

8、P-1b水平在三組之間無(wú)明顯差異。
　　 3.化療前后的小細(xì)胞肺癌患者，血清uPAR水平存在明顯差異(P<0.05)，Kaplan-Meier分析顯示uPAR水平的高低與患者預(yù)后顯著相關(guān)(P<0.05)，uPAR水平高(>2.057μg/L)的患者中位生存時(shí)間為13.3個(gè)月，uPAR水平低(<2.057μg/L)的患者中位生存時(shí)間為21.5個(gè)月。COX比例風(fēng)險(xiǎn)模型分析結(jié)果顯示uPAR可能是判斷SCLC患者生存的獨(dú)立預(yù)后因素(P<