Fas-FasL在小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文FasFasL在小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其臨床意義姓名：宿杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：田大力20040401實(shí)驗(yàn)方法1免疫組化染色：①石蠟切片常規(guī)二甲苯脫蠟15分鐘(min)，梯度酒精脫水后，蒸餾水沖洗。②3％過(guò)氧化氫滅活10min③組織抗原修復(fù)，將切片放入500ml工作液中置微波爐中加熱后，取出室溫冷卻，PBS液(PH74)沖洗。④6％正常山羊血清封閉，室溫孵育10rain，傾去血清，滴加一抗4。C過(guò)

2、夜。⑤將切片從冰箱中取出，PBS沖洗，滴加生物素標(biāo)記二抗，37。C孵育30mino@PBS沖洗，滴加第二代生物素標(biāo)記三抗，37℃孵育30min。⑦PBS沖洗，DAB顯色劑顯色，取蒸餾水085mi按順序加入A，B，C各50ul混勻，取50ul滴加到切片上，顯色時(shí)間15—25秒⑧自來(lái)水充分水洗，蘇木素復(fù)染3rain，水洗，鹽酸酒精分化4—5秒，充分水洗返藍(lán)10rain，二甲苯透明，梯度酒精脫水，中性樹(shù)脂封片。2判斷標(biāo)準(zhǔn)：Fas／FasL蛋白

3、陽(yáng)性染色標(biāo)準(zhǔn)主要為細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒，根據(jù)腫瘤組織細(xì)胞的染色率和染色強(qiáng)度進(jìn)行判斷，弱陽(yáng)性()淺棕黃色，腫瘤組織陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù)為5％一25％，陽(yáng)性()棕黃色，腫瘤組織陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù)為25％一50％，強(qiáng)陽(yáng)性()，深棕黃色，腫瘤組織陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù)為≥50％，陰性(一)偶有棕黃色細(xì)胞，但細(xì)胞數(shù)1000個(gè)。陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)以()以上定為陽(yáng)性。3統(tǒng)計(jì)分析：采用x2檢驗(yàn)。線性相關(guān)分析。數(shù)據(jù)經(jīng)spssll5軟件包處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1Fas／FasL蛋