Cox-2、P53在骨肉瘤中的表達及臨床意義.pdf

1、目的：本研究目的在于探討環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2,cox-2)蛋白、mt-P53(mutant type，p53)蛋白在骨肉瘤、骨軟骨瘤組織中的表達情況。分析兩者在骨肉瘤組織中表達的差異性及相互關(guān)聯(lián)性。通過該研究尋找骨肉瘤一種新的潛在標記物，進一步應用于臨床，為骨肉瘤的早期診斷、治療提供理論和指導。 方法：回顧河北醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院骨病科1998-2004年間收治的骨肉瘤患者檔案，篩選臨床、病理資料齊全的

2、骨肉瘤患者手術(shù)后組織石蠟切片40例作為試驗組。其中，男性患者24例，女性患者16例，年齡8-38歲(18.68±6.4.7)。篩選河北醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院骨病科同期收治的骨軟骨瘤患者手術(shù)后組織石蠟切片20例作為對照組。其中，男性患者13例，女性患者7例，年齡9-27歲(17.95±4.77)。以4μm厚度進行連續(xù)切片，應用免疫組織化學鏈霉素親生物素-過氧化物酶法(Streptavidin-biotin-Peroxidase-Comple

3、x，S-P)進行染色，嚴格遵循S-P染色試劑盒說明操作，cox-2蛋白染色一抗工作濃度為：1：50，p53蛋白染色一抗?jié)舛葹?：100。染色時均需微波修復抗原。光鏡下觀察染色切片，cox-2蛋白染色：以組織胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒者為陽性細胞；P53蛋白染色：以胞核內(nèi)出現(xiàn)界限清晰的棕黃色顆粒者為陽性細胞。隨機觀察5個高倍視野，依照陽性細胞所占比例分為：“一”陽性細胞所占比例<5％；“+” 陽性細胞所占比例5％-25％；“++”陽性細

4、胞所占比例26％-50％；“+++"陽性細胞所占比例>50％。分別統(tǒng)計兩者的陽性表達情況，所得數(shù)據(jù)應用SAS v6.12統(tǒng)計軟件處理，采用chi-square test進行x<'2>檢驗，α=0.05為水準，分別統(tǒng)計兩者在骨肉瘤、骨軟骨瘤組織細胞中陽性表達的差異性。采用Spearman等級相關(guān)分析法檢驗兩者在骨肉瘤中陽性表達之間的相關(guān)性，α=0.05為水準。 結(jié)果：1通過光鏡下觀察免疫組織化學染色狀況，40例骨肉瘤組織中27例c

5、ox-2蛋白染色顯示為陽性，且多為過高表達，陽性率為67.5％。20例骨軟骨瘤中僅3例顯示低陽性表達結(jié)果，陽性率為15％。陽性染色主要位于腫瘤組織的胞漿中。兩者存在顯著性差異，x<'2>=14.7，P<0.05，有統(tǒng)計學意義。 2 mt-P53蛋白于40例骨肉瘤中22例染色顯示為陽性結(jié)果，且多為高表達，陽性率為55.0％，陽性染色主要位于組織的胞核中。20例骨軟骨瘤中均未顯示陽性結(jié)果。兩者存在顯著性差異，x<'2>=17.368

6、，P<0.05，有統(tǒng)計學意義。 3 在40例骨肉瘤患者中有18例cox-2蛋白、mt-P53蛋白染色均為陽性，有9例染色均為陰性。通過Spearman等級相關(guān)分析法檢驗兩者在骨肉瘤中陽性表達的相關(guān)性，顯示兩者存在顯著正相關(guān)，r<,s>=0.58， p<0.05，有統(tǒng)計學意義。 結(jié)論：1經(jīng)本研究證實，cox-2蛋白在骨肉瘤組織細胞中多數(shù)呈現(xiàn)過高陽性表達，在良性腫瘤中少數(shù)呈現(xiàn)低陽性表達，兩者存在顯著性差異，提示cox-2蛋白

7、的過高表達與骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，cox-2有望成為骨肉瘤新的潛在標記物。 2 突變型p53(mt-p53)蛋白在良性骨腫瘤中不表達，mt-p53蛋白僅在骨肉瘤組織細胞中可被檢測到，這提示mt-p53基因可能與骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為腫瘤早期診斷和預后的指標。 3 cox-2蛋白、mt-p53蛋白在骨肉瘤中的表達呈正相關(guān)，提示在骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中兩者可能存在相互影響、相互協(xié)同作用。臨床上