The Effect of γ-TmT(γ-TocopheroL-Rich Mixture of Tocopherols)on Esophageal Squamous Cell Carcinoma In Vitro.pdf

1、目的：(1)使用γ-TMT、木犀草素和亞硒酸鈉單獨或及聯(lián)合對Eca-109細胞進行干預，探討其對細胞生長和細胞凋亡的作用。(2)觀察亞硒酸鈉、硒和γ-TMT單獨及聯(lián)合干預對食管癌Eca-109細胞抗氧化酶活性的影響。(3)評價亞硒酸鈉、γ-TMT和木犀草素對Eca-109細胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2，Bax和caspase-3的影響。
　　方法：(1)利用四甲基氮唑藍（Methyl Thiazolyl Tetrazolium，MTT

2、）法測定γ-TMT、亞硒酸鈉和木犀草素干預對Eca109細胞增殖的影響;倒置顯微鏡觀察不同劑量干預物對細胞形態(tài)學變化的影響;流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況。(2)使用試劑盒測定γ-TMT、木犀草素和亞硒酸鈉干預Eca-109細胞后不同劑量組抗氧化酶活性的指標，包括谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽還原酶(GR)、過氧化氫酶(CAT)、總超氧化物歧化酶(SOD)以及總抗氧化能力(TAOC)和丙二醛(MDA)的測定。(3)用γ-TMT

3、、木犀草素和亞硒酸鈉處理Eca-109細胞，提取蛋白和RNA，通過實時定量聚合酶鏈反應(qRT-PCR)測定Bcl-2和Bax兩個凋亡蛋白的表達，并通過酶聯(lián)免疫吸附法測定caspase-3蛋白表達，分析其在Eca-109細胞凋亡中的作用。
　　結(jié)果：(1)MTT分析結(jié)果表明，隨著γ-TMT濃度增加，其對細胞增殖的抑制作用顯著增加，具有劑量效應關(guān)系（p＜0.05）。流式細胞術(shù)分析細胞凋亡實驗結(jié)果表明γ-TMT可顯著誘導細胞凋亡(p＜

4、0.05)。γ-TMT與木犀草素聯(lián)合干預可抑制細胞增殖，誘導細胞凋亡，與γ-TMT單獨干預具有顯著差異。亞硒酸鈉干預食管上皮細胞可顯著抑制細胞增殖，并誘導細胞凋亡。亞硒酸鈉與γ-TMT聯(lián)合干預結(jié)果表明，與單獨干預結(jié)果比較，細胞增殖的抑制率及誘導細胞凋亡的凋亡率顯著增加(p＜0.05）。(2)亞硒酸鈉、γ-TMT和木犀草素對抗氧化酶活性的影響具有顯著差異，木犀草素對MDA活性沒有影響，γ-TMT對CAT活性沒有影響。(3)γ-TMT、木犀