龍膽DNA指紋圖譜分析及質(zhì)量相關(guān)性研究.pdf

1、實驗的目的是要根據(jù)國際上關(guān)于中草藥的質(zhì)量檢測標準建立一套中藥龍膽分子生物學及生物化學的指紋圖譜檢測技術(shù).實驗通過研究RAPD及ISSR反應(yīng)體系中的一些因素對反應(yīng)的影響,優(yōu)化RAPD及ISSR的PCR反應(yīng),建立了適用于龍膽的RAPD及ISSR分子標記方法.并用這2種分子標記方法對4種正品龍膽的43個樣品進行了DNA指紋分析.實驗用改進的SDS法提取的龍膽總DNA為模板進行RAPD及ISSR的PCR擴增,對產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果進行數(shù)據(jù)分析

2、.從100個RAPD引物和32個ISSR引物中分別篩選出9個RAPD引物和4個ISSR引物可用于遺傳多樣性分析.通過距離系數(shù)UPGMA聚類法分析電泳產(chǎn)物,構(gòu)建類聚關(guān)系樹狀圖.結(jié)果顯示堅龍膽與三花龍膽、龍膽、條葉龍膽的遺傳距離較遠,而三花龍膽、龍膽、條葉龍膽三種中三花龍膽和龍膽親緣關(guān)系較近.而且在4個品種的內(nèi)部也可見豐富的遺傳多樣性.在藥物有效成分含量分析方面,首先建立高效毛細管電泳法測定生藥龍膽中有效成分龍膽苦苷含量的新方法.實驗采用高