不同劑量X射線對SD大鼠成熟精子功能影響的研究.pdf

1、目的：
　　 研究不同劑量X射線照射后不同時間點SD大鼠成熟精子透明質酸酶(hyaluronidase HYD)活性及富含胱氨酸分泌蛋白(CRISP2)基因mRNA表達水平的影響，比較其與照射后精子活力的關系，探討電離輻射對精子活力影響的機制，為系統研究電離輻射對男性生殖功能的影響提供實驗依據。
　　 方法：
　　 以輻射劑量0、1、2、4、6Gy隨機分為5大組，每大組按1、4、8、12、24h時間點分為5小組。

2、以Precise分直線加速器產生的X線局部照射活體SD大鼠外生殖系統（劑量率為442.89cGy/min），用改良明膠底物膜法檢測大鼠成熟精子透明質酸酶活性，常規(guī)顯微鏡檢測大鼠成熟精子活力，采用PCR技術檢測大鼠成熟精子CRISP2基因mRNA表達水平。
　　 結果：
　　 1.精子HYD在X線照射后的活性變化。
　　 對照組各時間點頂體內透明質酸酶陽性反應率為(70.2±1.92)％、(67.6±5.81)％、

3、(69.8±2.16)％、(68±6.67)％、(71.2±2.86)％。4Gy、6Gyx射線照射不同時間(1、4、8、12、24h)后大鼠精子的HYD陽性反應率均較對照組顯著下降(6.28＜t＜25.8，P＜0.05)，其中6Gy照射后24h HYD反應率最低(t=25.8，P＜0.01);2Gy x射線照射不同時間（1、4、8、12、24小時）后大鼠精子的HYD陽性反應率較對照組下降，但結果無統計學意義(0.47＜t＜1.313，P

4、＞0.05)，2、4、6Gy照射組及對照組標本透明質酸酶反應率各時間點差異無統計學意義(P＞0.05)。
　　 2.精子CRISP2基因mRNA在×線照射后的表達水平變化。4、6 Gy x射線照射不同時間（1、4、8、12、24h時）后大鼠精子的CRISP2基因mRNA相對表達量均較對照組顯著下降(P＜0.05)，其中6 Gy照射24小時后相對表達量最低(P＜0.01)，而4Gy照射組與6Gy照射組相比較差異無統計學意義(P＞0

5、.05);2 Gy x射線照射8h后CRISP2 mRNA相對表達量下降有統計學意義(P＜0.05);2 Gyx射線照射1、4h后及1Gy x射線照射不同時間(1、4、8、12、24h)后大鼠精子的CRISP2 mRNA相對表達量較對照組下降，但差異無統計學意義(P＞0.05)。
　　 3. X線照射下精子活力與CRISP2基因mRNA及HYD的關系。
　　 以0Gy照射組為對照組，其精子平均活力（A+B級）是(78.3

6、7±4.046)％，1、2Gy x射線照射不同時間（1、4、8、12、24小時）及4Gy x射線照射(1、4、8小時)后，精子活力與正常對照組相比無明顯改變(P＞0.05);4Gy x射線照射12、24小時后大鼠精子活力顯著低于正常對照;6Gy x射線照射不同時間(1、4、8、12、24h)后，精子活力明顯低于對照組(P＜0.05)。精子活力與CRISP2基因mRNA及HYD的直線相關統計分析，得出呈直線相關，檢驗直線，相關系數分別為R

7、=0.802(0.944)，F值=41.37(150.47)，P＜0.05。
　　 結論：
　　 1.不同劑量x射線照射可導致SD大鼠精子活力下降，這可能與其下調CRISP2基因的mRNA表達水平和HYD活性有關。
　　 2.精子活力指標實驗檢測比單純精子常規(guī)參數可能更具反映其活力狀態(tài)。
　　 3.在一定劑量范圍內(2Gy)，精子受到X線照射后，CRISP2基因mRNA相對表達量不同時間點下降程度不同，可