南京長春兩地銀杏葉生物學(xué)特性及藥效成分研究.pdf

1、銀杏葉是銀杏科植物銀杏(Ginkgo biloba Linn.)的干燥葉。銀杏樹原產(chǎn)我國，是當(dāng)今地球上最古老的樹種之一。到目前為止，人們對于銀杏樹的科學(xué)研究涉及到其結(jié)構(gòu)、生理、遺傳、引種、藥用開發(fā)等諸多方面，其中藥用開發(fā)是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。銀杏的葉片和種子均具有重大的藥用價(jià)值，葉片的價(jià)值尤為突出。 本試驗(yàn)以南京產(chǎn)12年樹齡銀杏樹葉和從南京引種到長春12年樹齡的銀杏樹葉為實(shí)驗(yàn)材料，對兩地銀杏葉從生物學(xué)基礎(chǔ)、主要藥效成分含量和遺傳物質(zhì)

2、DNA多態(tài)性方面進(jìn)行比較研究。本研究工作主要分為以下三個(gè)部分： 第一部分，在生物學(xué)基礎(chǔ)研究方面，采用石蠟切片法和光學(xué)顯微鏡技術(shù)，對兩地銀杏葉片和葉柄制片并進(jìn)行觀察，可見一些環(huán)境適應(yīng)性的結(jié)構(gòu)演化。在兩地的銀杏葉片中，表皮的角質(zhì)層均顯著、氣孔均為下陷類型，均顯現(xiàn)出乏水環(huán)境誘導(dǎo)的一種適應(yīng)性結(jié)構(gòu)。南京銀杏的葉柄中細(xì)胞間隙發(fā)達(dá)，而長春銀杏葉柄中的細(xì)胞間隙較少，說明南京銀杏葉較長春銀杏葉通氣組織發(fā)達(dá)。兩地銀杏的葉片中均存在晶體，而長春的銀杏

3、的葉片中晶體數(shù)量較少，晶體可改變細(xì)胞滲透壓，提高吸水和持水力，還可加強(qiáng)葉的機(jī)械性能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示長春銀杏葉的機(jī)械性能不如南京銀杏葉。采用茚三酮顯色法比較相同采摘期兩地銀杏葉中脯氨酸含量，結(jié)果顯示長春地銀杏葉脯氨酸含量顯著增加，增量高達(dá)380％，結(jié)果說明長春地銀杏葉脯氨酸含量的顯著增加與東北寒冷的氣候相關(guān)，此實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明銀杏在逆境下具有較強(qiáng)的抗性。同時(shí)采用硝化法測定銀杏林土壤中全氮的含量，結(jié)果顯示長春銀杏林中土壤全氮含量顯著高于南京銀杏林

4、，結(jié)果說明長春銀杏林地的土壤N肥肥力強(qiáng)于南京銀杏林地，其土壤微生物對有機(jī)質(zhì)的分解速率也高。 第二部分，在藥效成分研究方面，對兩地銀杏葉主要藥效成分黃酮、萜內(nèi)酯和多糖含量進(jìn)行測定。黃酮和萜內(nèi)酯均采用索氏提取法，為避免葉綠素的干擾，提取前先用三氯甲烷去葉綠素，測定采用高效液相色譜法，結(jié)果顯示長春銀杏葉中總黃酮含量顯著高于南京銀杏葉，而長春銀杏葉萜內(nèi)酯A、內(nèi)酯B和內(nèi)酯C含量都顯著低于南京產(chǎn)銀杏葉的含量，多糖含量測定采用蒽酮比色法，結(jié)果

5、顯示兩地銀杏葉多糖含量相近，藥效成分的含量測定結(jié)果說明從南京引種到長春的銀杏葉的主要藥效成分的總量相近，黃酮成分與萜內(nèi)酯成分的比例略有差別，長春銀杏葉將起的藥效作用是否與原產(chǎn)地一致，還有待進(jìn)一步研究。 第三部分，在遺傳物質(zhì)鑒別研究方面，采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA即RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)的方法，用10種引物對兩地銀杏葉提取的DNA進(jìn)行擴(kuò)增，對電泳譜帶進(jìn)行比較，結(jié)果顯示二者譜帶相近