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文檔簡介
1、目的:百合為百合科(Liliaceae)百合屬(lilium)植物卷丹Liiium lancifolium Thunb.、百合L.brownii F.E.Brown var.viridulumBaker和細葉百合L.pumilumDC.的干燥肉質鱗葉,為臨床常用中藥材,也是湖南省大宗道地藥材之一。對中藥材百合的鑒定,國內外文獻資料中報道主要采用的方法是性狀鑒別、顯微鑒別和理化鑒別,目前從分子水平探討其遺傳差異并對其進行鑒別僅見一篇相關研
2、究報道。本研究應用RAPD技術對湖南、甘肅、江蘇、江西、廣西五個產地的百合及大百合Cardiocrinum giganteum(Wall.)Makino進行了分析,探討了分子生物學技術在中藥材百合品種品系鑒定及親緣關系分析上的應用,為鑒定中藥材百合品種品系的新方法提供了充分的實驗依據。 研究方法:采用RAPD技術對百合鱗葉基因組DNA的多態(tài)性進行分析;利用紫外凝膠成像系統(tǒng)通過對電泳圖像分析建立了百合基因組DNA指紋圖譜;利用NT
3、SYS軟件進行品種品系間UPGMA聚類分析。 研究結果與結論: 1、建立了適合百合的PCR-RAPD反應體系; 2、從120條隨機引物中篩選出35條有效引物,對所有供試材料進行擴增,共獲得35張DNA電泳圖譜,769條DNA譜帶,其中767條為多態(tài)帶; 3、利用凝膠成像分析系統(tǒng),對電泳圖像進行分析,建立了DNA的指紋圖譜; 4、建立了基于RAPD技術的百合親緣關系樹型圖,樹型圖的聚類結果與用經典方法鑒定的
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