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文檔簡介
1、本試驗選取侵染百合的最重要的3種病毒—黃瓜花葉病毒(CMV)，百合無癥病毒(LSV)，百合斑駁病毒(LMoV)為主要研究材料，煙草花葉病毒(TMV)、馬鈴薯Y病毒(PVY)為輔助研究材料，將寡核苷酸芯片檢測技術(shù)應(yīng)用于5種病毒檢測及鑒定的研究，主要從以下幾個方面進行研究： 一、針對上述5種病毒外殼蛋白(CP)基因保守序列的5個基因片段各設(shè)計一對特異引物，按Trizol法提取植物總RNA，經(jīng)RT-PCR擴增并對擴增產(chǎn)物測序。
2、 二、通過序列比對在CP基因保守區(qū)設(shè)計用于檢測及鑒定CMV、LSV和LMoV及TMV、PVY病毒的探針并制備寡核苷酸芯片。 三、針對影響RT-PCR產(chǎn)物雜交信號的有關(guān)因素如雜交液成分、雜交時間、雜交溫度等進行優(yōu)化。 四、用制備好的寡核苷酸芯片對病毒的陽性標本及田間標本進行了RT-PCR和芯片檢測，兩種方法互相印證均適于對CMV、LSV、LMoV和TMV、PVY的檢測；對其它的8種植物病毒和熒光素酶基因檢測并設(shè)立重復(fù)。另外
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