雙側(cè)肺門迷走神經(jīng)切斷術(shù)治療支氣管哮喘的實驗研究.pdf

1、背景:支氣管哮喘是全球性的嚴重健康難題，全世界絕大部分國家的各年齡層的人群均可受到該疾病的不同程度的困擾。病因還不明確，與多基因遺傳有關(guān)，同時受遺傳因素和環(huán)境因素的雙重影響。哮喘的發(fā)病機制也不完全清楚，變態(tài)反應(yīng)、氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性、神經(jīng)等因素及其相互作用與哮喘的發(fā)病關(guān)系密切。臨床上以內(nèi)科保守治療為主的治療手段不能完全控制哮喘的發(fā)作或徹底的治愈。近年來的大量研究證明哮喘發(fā)病與支配氣道的植物神經(jīng)失衡密切相關(guān)，其中迷走神經(jīng)最為關(guān)鍵。刺激迷

2、走神經(jīng)引起支氣管收縮，這在動物實驗中已經(jīng)得到證明，臨床上也觀察到切斷肺門迷走神經(jīng)可使哮喘病人的癥狀得到明顯緩解。但其治療機制尚未明了，缺乏可靠的理論基礎(chǔ)與實驗研究。我們在前期研究中成功建立了狗的哮喘模型，并通過手術(shù)實施雙側(cè)肺門迷走神經(jīng)切斷術(shù)，證實了該手術(shù)治療方法的可行性及有效性。本實驗在建立確切的動物模型基礎(chǔ)之上，通過再次建立和印證該模型，并通過放免法測定系列與哮喘發(fā)作關(guān)系密切的神經(jīng)肽、免疫介質(zhì)、炎癥細胞因子等指標，從神經(jīng)、免疫、炎癥的

3、分子水平研究雙側(cè)肺門迷走神經(jīng)切斷術(shù)治療哮喘的有效性機制。同時在預(yù)實驗手術(shù)基礎(chǔ)之上，將肺門迷走神經(jīng)切斷術(shù)再分成完全切斷及不完全切斷兩種術(shù)式，以期探討肺門迷走神經(jīng)切斷的范圍與手術(shù)有效性、術(shù)后并發(fā)癥的關(guān)系。 目的:從神經(jīng)、免疫、炎癥的分子水平研究哮喘發(fā)作與迷走神經(jīng)的相關(guān)性機制及肺門迷走神經(jīng)切斷術(shù)治療哮喘的有效性機制。2.探討肺門迷走神經(jīng)切斷的范圍與手術(shù)有效性之間的關(guān)系。 方法:首先對備選狗行豬蛔蟲抗原皮試，皮試陽性狗隨機分為三

4、組：A組(雙側(cè)開胸+雙側(cè)肺門迷走神經(jīng)完全切斷術(shù))、B組(雙側(cè)開胸術(shù))、C組(雙側(cè)開胸+雙側(cè)肺門迷走神經(jīng)不完全切斷術(shù))，每組5只。采用經(jīng)氣管插管給予豬蛔蟲抗原霧化吸入的方法，建立狗哮喘模型?？乖ぐl(fā)后2天，A組行雙側(cè)開胸+雙側(cè)肺門迷走神經(jīng)完全切斷術(shù)(即切斷肺門迷走神經(jīng)前分支和后分支)；B組行雙側(cè)開胸術(shù)，不予切斷肺門迷走神經(jīng)；C組行雙側(cè)開胸+雙側(cè)肺門迷走神經(jīng)不完全切斷術(shù)(即切斷肺門迷走神經(jīng)后分支，保留肺門迷走神經(jīng)前分支)。術(shù)后第5天，再次給

5、予經(jīng)氣管插管豬蛔蟲抗原霧化吸入激發(fā)，比較分析兩次激發(fā)三組組間的差異及各組激發(fā)前后的差異。 檢測指標包括激發(fā)前5分鐘、激發(fā)后5分鐘、激發(fā)后30分鐘狗的呼吸頻率(RR)、氣道壓峰值(Ppeak)、潮氣量(TV)、肺動態(tài)順應(yīng)性(Cdyn)、心率(HR)、平均動脈壓(MAP)；激發(fā)前5分鐘、激發(fā)后5分鐘動脈血氧分壓(PaO2)、動脈血二氧化碳分壓(PaCO2)；激發(fā)前5分鐘、激發(fā)后5分鐘、激發(fā)后30分鐘血漿/清P物質(zhì)(SP)、一氧化氮(

6、NO)、環(huán)腺苷酸(CAMP)、環(huán)鳥苷酸(CGMP)、免疫球蛋白E(IgE)、白細胞介素—4(IL-4)、降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)等指標。 本研究采用的評價指標為連續(xù)型變量，總體符合正態(tài)分布。實驗設(shè)計上采用三組隨機對照的方法，數(shù)據(jù)以統(tǒng)計軟件SPSS11處理。三組之間各評價指標激發(fā)后變化值的比較用單因素方差分析；每組樣本激發(fā)前后各評價指標差別的顯著性檢驗用配對t檢驗。凡涉及均數(shù)結(jié)果以X±S形式給出，當P＜0.05時認為差異具有顯

7、著性。 結(jié)果:第一次豬蛔蟲抗原激發(fā)后，三組實狗均產(chǎn)生了呼吸急促、費力，聽診雙肺有哮鳴音等哮喘反應(yīng)，激發(fā)后5分鐘處于哮喘急性發(fā)作期，實驗狗呼吸動力學(xué)、血流動力學(xué)指標均發(fā)生明顯變化，激發(fā)后30分鐘，重度哮喘表現(xiàn)有所緩解，各項指標也出現(xiàn)回轉(zhuǎn)(見表1)。 此外，第一次激發(fā)后5分鐘、30分鐘血漿/清系列神經(jīng)肽、免疫介質(zhì)、炎癥細胞因子等指標也發(fā)生了改變(見表2)。 第二次激發(fā)后，A組無哮喘發(fā)作表現(xiàn)，而B組、C組仍然有典型的哮

8、喘發(fā)作表現(xiàn)，A組的呼吸、血流動力學(xué)指標激發(fā)后變化不大，同B、C組比較差異具有顯著性(P＜0.05)(見表3)。 第二次抗原激發(fā)后，三組狗血漿/清放免法檢測指標變化情況(見表4)。組A、C術(shù)后血漿SP、cAMP濃度及cAMP/cGMP比值與B組比較差異有顯著性(P＜0.05)。 結(jié)論:1.迷走神經(jīng)興奮是哮喘發(fā)作的重要因素，也是神經(jīng)肽、免疫介質(zhì)、炎癥細胞因子參與引起哮喘發(fā)作的關(guān)鍵步驟。2.雙側(cè)肺門迷走神經(jīng)切斷術(shù)阻斷了哮喘發(fā)病