量子點標記熒光免疫吸附測定法的建立和應(yīng)用.pdf

1、近年來，食品安全的問題引起了全世界的普遍關(guān)注，尤其是動物性食品中抗生素殘留超標的問題。建立一種靈敏、快速、安全、經(jīng)濟的生物學(xué)檢測方法成為國內(nèi)外研究的熱點。隨著納米技術(shù)的快速發(fā)展，一種新型的熒光半導(dǎo)體納米微晶體——量子點問世，而結(jié)合量子點進行獸藥殘留的快速檢測是分析領(lǐng)域的一條新途徑。 本試驗首次將納米材料——量子點應(yīng)用于獸藥殘留檢測，建立了雞肌肉組織中恩諾沙星(Enrofloxacin，ENR)和磺胺二甲嘧啶(Sulfametha

2、zine，SM2)殘留檢測的量子點標記熒光免疫吸附測定方法(fluorescence-linkedimmunosorbentassay，F(xiàn)LISA)。并且將FLISA方法與酶聯(lián)免疫檢測方法(enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)方法和高效液相色譜法(high-performanceliquidchromatography，HPLC)進行了比較，以此來驗證量子點標記的熒光免疫吸附測定法進行獸藥殘留檢測

3、的可行性。 以ENR的單克隆抗體建立的FLISA方法中，檢測限為2.5ng/g。在雞肌肉中添加50、100、200ng/g三個濃度，回收率在81.0％～94.7％之間，變異系數(shù)在9.9％～13.0％之間。在實際樣品的檢測中，將FLISA方法與ELISA方法測定的結(jié)果進行比較，沒有顯著性差異(t=0.789，P＞0.05)；FLISA方法與HPLC方法測定的結(jié)果進行比較，沒有顯著性差異(t=0.252，P＞0.05)。 以

4、SM2的單克隆抗體建立的FLISA方法中，檢測限為1.0ng/g。在雞肌肉中添加50、100、200ng/g三個濃度，回收率在80.6％～117.4％之間，變異系數(shù)在6.9％～9.6％之間。在實際樣品的檢測中，F(xiàn)LISA方法測定的結(jié)果與ELISA方法和HPLC方法的結(jié)果相似。 本試驗結(jié)果表明，量子點標記的FLISA方法可以用于恩諾沙星和磺胺二甲嘧啶在雞肌肉組織中的殘留檢測，滿足農(nóng)業(yè)部規(guī)定的獸藥殘留分析的要求，為該方法用于其它藥物