加壓毛細管電色譜法用于銀杏葉的質(zhì)量控制及其藥物動力學(xué)研究.pdf

1、銀杏葉為近年來國內(nèi)外中藥（植物藥）研究開發(fā)的熱點之一。其所含化學(xué)成分非常復(fù)雜，包括黃酮類、萜類、生物堿、多糖類、酚類、氨基酸、微量元素等。 銀杏葉中黃酮類化合物含量較高，其中以槲皮素、異鼠李素和山萘酚的糖苷為主。許多實驗已證實，銀杏葉中黃酮類物質(zhì)具有非常廣泛的生理和藥理活性，如擴張冠狀血管、抗炎癥、抗氧化、抗病毒、調(diào)節(jié)免疫功能等。本文首次采用加壓毛細管電色譜法（pressurized capillary electrochrom

2、atography，pCEC）對銀杏葉中黃酮類化合物進行分離，并以主要活性成分槲皮素和山萘酚為主要指標，研究其在大鼠體內(nèi)的藥物動力學(xué)。首次建立了銀杏葉藥材的加壓毛細管電色譜指紋圖譜，應(yīng)用了相似度分析和主成分分析對不同產(chǎn)地銀杏葉藥材的質(zhì)量進行了評價。 本論文共分四章，主要內(nèi)容包括： 第一章介紹了選題背景和意義。主要介紹了銀杏葉的化學(xué)成分和藥理活性，綜述了加壓毛細管電色譜法的原理和研究進展，闡述了中藥指紋圖譜的重要意義。

3、 第二章的工作，主要是建立了加壓毛細管電色譜法對銀杏葉中黃酮類化合物進行分離的條件。通過對檢測波長、流動相、離子強度、電壓各主要因素的考察，最終建立的電色譜條件為：流動相：甲醇-磷酸溶液（10 mM）（55：45，v/v）等度洗脫；檢測波長：360 nm；檢測電壓為10 kV。并同時比較了在此相同條件下pCEC、毛細管液相色譜（cLC）、高效液相色譜（HPLC）的分離效果，發(fā)現(xiàn)pCEC能在最短的時間內(nèi)達到最高的柱效，說明pCEC與c

4、LC、HPLC相比，具有分析速度快，分離效率高的優(yōu)勢，是一個很好的微分離手段。 第三章的工作，以銀杏葉中的指標性有效成分槲皮素和山萘酚為研究對象，采用加壓毛細管電色譜法（pCEC）研究其在大鼠體內(nèi)的藥物動力學(xué)。以SD雄性大鼠為實驗動物，灌胃給藥后，用甲醇-磷酸溶液（10 mM）（55：45，v/v）等度洗脫，在電壓為6 kV下測定大鼠血漿中槲皮素和山萘酚的含量，并繪制藥－時曲線。結(jié)果顯示槲皮素和山萘酚的達峰時間均為2 h，且山萘

5、酚吸收不規(guī)則，出現(xiàn)多峰現(xiàn)象。 第四章以10批不同產(chǎn)地的銀杏葉藥材為研究對象，采用填充5 μm粒徑C18填料的毛細管色譜柱，通過對藥材提取、流動相、電壓各主要影響因素的考察，優(yōu)化了加壓毛細管電色譜銀杏葉指紋圖譜的條件，首次建立了銀杏葉的加壓毛細管電色譜指紋圖譜。采用了國家藥典委員會頒布的“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”軟件對不同產(chǎn)地的銀杏葉進行了相似度的評價，評價的結(jié)果顯示除7號樣品的相似度為0.676外其他九批藥材的相似度均在

6、0.900以上，相似度高，說明這九批藥材的質(zhì)量是相對穩(wěn)定的。另外還應(yīng)用了主成分分析對不同產(chǎn)地銀杏葉進行了分類，結(jié)果與相似度評價結(jié)果都是較為一致的，為銀杏葉藥材的質(zhì)量分析和控制提供了可靠的依據(jù)。 本文通過應(yīng)用現(xiàn)代微分離色譜技術(shù)加壓毛細管電色譜對銀杏葉藥材進行了中藥現(xiàn)代化研究，并研究了其指標成分的藥物動力學(xué)，首次建立了銀杏葉的加壓毛細管電色譜指紋圖譜，并且對其質(zhì)量進行了評估，發(fā)展了微量電色譜技術(shù)對銀杏葉進行分離和鑒定研究，為中藥分離