紅松種子園優(yōu)良無(wú)性系遺傳結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、林木種子園是連接育種與育林的橋梁，是重要的種子生產(chǎn)群體，其子代的遺傳多樣性將直接影響到人工群體的穩(wěn)定性和適應(yīng)性。本文以吉林省露水河紅松種子園優(yōu)良無(wú)性系和露水河天然紅松為研究對(duì)象，利用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)分析了種子園和天然紅松的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)。 1.采用改良的CTAB法提取紅松胚乳DNA，經(jīng)檢測(cè)，該方法提取的DNA純度和含量較高，單粒種子胚乳DNA得率基本滿足大量PCR擴(kuò)增的需要。建立了穩(wěn)定的、可重復(fù)的紅松ISSR-PCR最

2、佳反應(yīng)體系及PCR擴(kuò)增程序，篩選出了擴(kuò)增條帶清晰、多態(tài)性豐富的14個(gè)ISSR引物。 2.ISSR-PCR所用的14個(gè)引物擴(kuò)增帶數(shù)103條，其中多態(tài)位點(diǎn)63個(gè)，總的多態(tài)位點(diǎn)百分比為61.17％，平均多態(tài)位點(diǎn)4.5條；Nei指數(shù)為0.1798，Shannon指數(shù)為0.2751，群體基因分化度Gst平均值為0.0276，基因流系數(shù)Nm為8.8079，種子園和天然紅松群體內(nèi)的基因多樣性占總?cè)后w的97.24％，群體間占2.76％：AMOV

3、A對(duì)種子園和天然紅松群體的分析結(jié)果與Nei’s遺傳多樣性分析所得到的遺傳分化系數(shù)基本一致，在總的遺傳變異中有3.24％的變異發(fā)生在群體間，有96.76％的變異發(fā)生在種子園內(nèi)和天然群體內(nèi)，群體的遺傳變異主要存在于群體內(nèi)。 3.紅松種子園多態(tài)位點(diǎn)百分比59％；有效等位基因數(shù)Ne為1.2992；Shannon指數(shù)I為0.2674；Nei指數(shù)h為0.1759。天然紅松多態(tài)位點(diǎn)百分比為55.45％；有效等位基因數(shù)Ne為1.2961：Sha

4、nnon指數(shù)I為0.2624：Nei指數(shù)h為0.1727。從紅松種子園的各參數(shù)值與露水河天然紅松群體的相比較來(lái)看，種子園各值比天然群體的相應(yīng)平均值高，說(shuō)明紅松種子園具有較廣泛的遺傳基礎(chǔ)和遺傳多樣性，紅松種子園的建立是紅松遺傳改良的有效途徑之一。 4.對(duì)種子園內(nèi)7個(gè)紅松種源進(jìn)行遺傳結(jié)構(gòu)和遺傳多樣性分析，種源多態(tài)位點(diǎn)百分比按由大到小的順序?yàn)椋何髁趾?、宏偉、?lián)營(yíng)、麗林、東升、寒月和永華。西林河種源多態(tài)位點(diǎn)百分比最高為43.37％，永華

5、種源最低為33.33％?；蚍只禂?shù)為0.2021，遺傳變異主要存在于種源間。種源間遺傳距離和遺傳一致度均值分別為0.0521和0.9493，種子園內(nèi)7個(gè)紅松種源的遺傳距離與地理距離相關(guān)性不明顯(r=0.063，P=0.412)。 5.采用ISSR標(biāo)記分析的方法對(duì)紅松種子園內(nèi)的三個(gè)亞區(qū)進(jìn)行遺傳分析，三個(gè)亞區(qū)的多態(tài)位點(diǎn)百分比：南亞＞北亞＞中亞：Shannon指數(shù)為0.2557＞0.2416＞0.2148，基因流Nm為1.9000，