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1、糖尿病是臨床常見的內(nèi)分泌代謝性疾病之一,中藥血竭及其提取物對(duì)于治療糖尿病有重大的潛在意義。以活性為指導(dǎo)的中藥有效成分的篩選方式具有簡(jiǎn)單便捷的特點(diǎn),也為中藥中金屬元素與藥效關(guān)系的研究提供支持。本論文工作以活性為指導(dǎo),對(duì)中藥血竭進(jìn)行分離提取,得到若干對(duì)α-葡萄糖苷酶具有抑制力的活性組分;并對(duì)組分中金屬元素的含量、化學(xué)形態(tài)與活性進(jìn)行相關(guān)性分析,內(nèi)容具體如下: (一)測(cè)定了五種不同來源血竭中金屬元素鐵、錳、銅、鈣、鎂含量及對(duì)α-葡萄糖苷
2、酶的抑制活力,結(jié)果表明:進(jìn)口的新加坡血竭中的各金屬元素含量最高,而其活性最低,國(guó)產(chǎn)四種血竭中的金屬元素含量較低,活性相近,且明顯都高于進(jìn)口血竭;在同一血竭的金屬元素中Ca的含量最高,其次依次為Mg、Fe、Mn、Cu,不同產(chǎn)地血竭金屬元素含量明顯不同,同一產(chǎn)地同一元素含量較為接近,以上結(jié)果可為中藥材的鑒別及藥效提供依據(jù)。 (二)用有機(jī)溶劑萃取分離得到的一系列活性組分,對(duì)其活性及其中五種金屬元素含量進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果表明:芒果牌龍血竭
3、原藥經(jīng)過石油醚索氏抽提脫脂,各元素的含量明顯增加;石油醚索氏抽提殘余物經(jīng)丙酮萃取,金屬元素發(fā)生明顯遷移:萃取物中每種元素含量低于萃余物,丙酮萃取物活性較高;將丙酮萃取物經(jīng)乙酸乙酯萃取,出現(xiàn)類似情況;另外發(fā)現(xiàn),鈣、鎂兩種元素的遷移尤為明顯。 (三)測(cè)定了多次水煎得到的一系列活性組分中金屬元素含量及相應(yīng)活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn):隨著水煎次數(shù)的增加,鐵、銅含量發(fā)生富集;錳、鈣、鎂含量逐漸減少,其中鈣、鎂尤為明顯;血竭的活性隨水煎次數(shù)的增加呈提高
4、趨勢(shì)。 (四)應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS12.0,基于多元逐步回歸分析對(duì)血竭活性組分中金屬元素含量及其活性進(jìn)行相關(guān)性研究,得到回歸模型[ID50]=-0.522+0.013[Ca]+0.234[Mn](R=0.975,P<0.05),并對(duì)此模型進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,篩選出兩個(gè)對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制劑活性具有顯著影響的元素鈣和錳。 (五)結(jié)合高效液相圖譜和紅外圖譜,對(duì)有機(jī)溶劑法及水煎法得到的活性有機(jī)成分進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)鐵元素在血竭中與極性
5、較小的有機(jī)成分結(jié)合的比例較高,而鈣、鎂與極性較大的有機(jī)成分結(jié)合比例較高。 (六)參照中藥微量元素形態(tài)分析方法,對(duì)血竭中金屬元素形態(tài)進(jìn)行分析,得到各元素的溶出率分別為Ca:99.51%,Mg:96.93%,F(xiàn)e:10.65%,Mn:63.38%,Cu:14.64%;血竭溶出部分中,懸浮態(tài)與可溶態(tài)比例分別為:鐵60:100;錳27:100;鈣12:100;鎂34:100;可溶性部分中,無機(jī)態(tài)與有機(jī)態(tài)比例分別為:鐵100:22;鈣10
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