鼻腔滴注白細(xì)胞介素-22對(duì)小鼠變應(yīng)性鼻炎的緩解作用.pdf

1、第一部分鼻腔滴注白細(xì)胞介素-22對(duì)小鼠變應(yīng)性鼻炎的緩解作用
　　目的：探討鼻腔滴注重組小鼠白細(xì)胞介素-22（recombination murine interleukin-22/rm-IL-22）對(duì)小鼠變應(yīng)性鼻炎免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：將24只6~8周的雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為3組，每組8只，分別為對(duì)照組、模型組和IL-22組。模型組和IL-22組建立小鼠變應(yīng)性鼻炎模型，同時(shí)IL-22組在每次激發(fā)前鼻腔滴注rm

2、-IL-22。首先應(yīng)用間接免疫熒光法檢測(cè)鼻黏膜上皮細(xì)胞是否表達(dá)IL-22受體（IL-22R1），最后一次激發(fā)后記錄三組小鼠10分鐘的抓撓數(shù)和噴嚏數(shù)，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）檢測(cè)外周血清中卵白蛋白-特異性IgE（OVA-sIgE）的濃度，檢測(cè)鼻腔灌洗液中干擾素-γ（IFN-γ）、白細(xì)胞介素-4（IL-4）、白細(xì)胞介素-5（IL-5）、白細(xì)胞介素-10（IL-10

3、）和胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素（thymic stromal lymphopoietin, TSLP）的濃度，HE染色觀察鼻黏膜局部嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)情況。最后利用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：IL-22R1在小鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞表達(dá)，IL-22組較模型組小鼠變應(yīng)性鼻炎抓撓和噴嚏癥狀減輕，鼻腔灌洗液中IL-4、IL-5和外周血清中OVA-sIgE的濃度較模型組降低，局部嗜酸性

4、粒細(xì)胞數(shù)侵潤(rùn)減少，三組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，鼻腔灌洗液中IFN-γ、IL-10和TSLP的濃度在IL-22組和模型組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：鼻腔滴注rm-IL-22可以抑制變應(yīng)性鼻炎小鼠的免疫應(yīng)答，有望成為治療變應(yīng)性鼻炎的一種新方法。
　　第二部分三種重組腺相關(guān)病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)綠色熒光蛋白在小鼠鼻黏膜的表達(dá)
　　目的：探討重組1、2和8型腺相關(guān)病毒（rAAV1、rAAV2和rAAV8）載體經(jīng)小鼠鼻腔滴注轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)綠

5、色熒光蛋白（EGFP）基因在鼻黏膜上皮細(xì)胞的表達(dá)情況。
　　方法：6只6~8周的雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為3組，每組2只。用帶有EGFP基因的重組1、2和8型腺相關(guān)病毒進(jìn)行小鼠鼻腔滴注，第4周處死小鼠，獲得小鼠完整鼻腔，固定脫鈣后冰凍切片，然后在熒光顯微鏡下觀察EGFP在三組小鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：rAAV1載體攜帶的EGFP成功轉(zhuǎn)染，第4周穩(wěn)定表達(dá)，另外兩型重組腺相關(guān)病毒攜帶的EGFP均未見(jiàn)在小鼠鼻黏膜