浙貝止咳顆粒對(duì)致病微生物的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：浙貝止咳顆粒是在治療急性氣管-支氣管炎民間驗(yàn)方長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)使用的基礎(chǔ)上研制而成的中成藥。大量臨床實(shí)踐表明，中醫(yī)藥在抗菌、抗病毒方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和廣闊的發(fā)展前景。浙貝止咳顆粒中一些中藥成份的抗菌、抗病毒作用在許多文獻(xiàn)資料中都有報(bào)道。本課題擬在進(jìn)行浙貝止咳顆?？咕⒖共《咀饔眉捌洳糠挚赡艿淖饔脵C(jī)制研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步對(duì)其鎮(zhèn)咳、祛痰等相關(guān)藥效學(xué)作用進(jìn)行研究，進(jìn)而探討浙貝止咳顆粒作為中藥制劑對(duì)于治療急性氣管-支氣管炎及其相關(guān)機(jī)制的作用，從而為預(yù)

2、防以及治療急性氣管-支氣管炎提供一種可行的途徑。
　　 方法：本文主要進(jìn)行了浙貝止咳顆粒體內(nèi)外抗菌、抗病毒作用和鎮(zhèn)咳、祛痰等相關(guān)藥效學(xué)研究。通過(guò)測(cè)量浙貝止咳顆粒的抑菌圈直徑、最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MBC)觀察其體外抗菌作用；以浙貝止咳顆粒對(duì)細(xì)菌感染的小鼠死亡保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)觀察其體內(nèi)抗菌作用；以甲型H1N1流感病毒致MDCK細(xì)胞和雞胚成纖維細(xì)胞(CEF)病變?yōu)橛^察指標(biāo)，采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)浙貝止咳顆粒體外抗

3、病毒作用；體內(nèi)抗病毒試驗(yàn)應(yīng)用小鼠滴鼻感染甲型H1N1流感病毒造模，灌胃給藥，通過(guò)觀察其對(duì)流感病毒感染小鼠的死亡保護(hù)作用、肺指數(shù)的影響，從整體水平上考察浙貝止咳顆?？共《镜淖饔眯Ч?，通過(guò)對(duì)病毒性肺炎標(biāo)本進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察，初步探討其作用機(jī)制；采用昆明種小鼠氨水引咳實(shí)驗(yàn)觀察其鎮(zhèn)咳作用，采用昆明種小鼠酚紅排泌實(shí)驗(yàn)和SD大鼠毛細(xì)管排痰實(shí)驗(yàn)觀察其祛痰作用，從藥效方面觀察浙貝止咳顆粒的治療作用。
　　 結(jié)果：
　　 1、體外抗菌實(shí)驗(yàn)

4、：浙貝止咳顆粒對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑為14mm，MIC為10.55mg/mL，MBC為21.1mg/mL；對(duì)肺炎鏈球菌的抑菌圈直徑為16mm，MIC為42.19mg/mL，MBC為84.38mg/mL；對(duì)甲型溶血性鏈球菌的抑菌圈直徑為18mm，MIC為42.19mg/mL，MBC為84.38mg/mL；對(duì)乙型溶血性鏈球菌的抑菌圈直徑為20mm，MIC為21.1mg/mL，MBC為84.38mg/mL。(注：藥物濃度以生藥計(jì))

5、>　　 2、體內(nèi)抗菌實(shí)驗(yàn)：染菌后浙貝止咳顆粒高、中劑量組小鼠死亡率分別為30％和40％，與生理鹽水組(死亡率為100％)相比，差異顯著(P<0.01)，與陽(yáng)性對(duì)照藥相比，無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　 3、體外抗病毒實(shí)驗(yàn)：浙貝止咳顆粒對(duì)MDCK細(xì)胞的半數(shù)有毒濃度(TC50)為110.81mg/mL，對(duì)抑制流感病毒致MDCK細(xì)胞病變的半數(shù)有效濃度(IC50)為1.41mg/mL，治療指數(shù)(TI)為78.6；浙貝止咳顆粒對(duì)抑

6、制流感病毒致雞胚成纖維細(xì)胞細(xì)胞病變的最低抑制濃度為8.5mg/mL。
　　 4、體內(nèi)抗病毒實(shí)驗(yàn)：浙貝止咳顆粒高、中劑量組對(duì)感染甲型H1N1流感病毒的小鼠死亡保護(hù)率分別為71.4％、64.3％，與病毒對(duì)照組比較，差異顯著(P<0.05，P<0.01)，與陽(yáng)性對(duì)照利巴韋林組比較，無(wú)顯著性差異(P>0.05)；浙貝止咳顆粒高、中劑量組小鼠的肺指數(shù)明顯降低，與模型組相比差異顯著(P<0.05，P<0.01)；浙貝止咳顆粒對(duì)小鼠病毒性肺炎

7、有抑制作用并具有正的量效關(guān)系，即在一定情況下，劑量越大，越能有效地抑制流感病毒所致的小鼠肺炎，肺組織病理形態(tài)學(xué)觀察可見(jiàn)，浙貝止咳顆粒各組與模型組比較，小鼠肺臟組織結(jié)構(gòu)較完整，肺泡間隔基本接近正常，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減少。
　　 5、相關(guān)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)：與模型對(duì)照組相比，浙貝止咳顆粒高、中劑量治療組可以明顯減少小鼠的咳嗽次數(shù)，延長(zhǎng)氨水所致小鼠咳嗽潛伏期(P<0.01)；增加小鼠離體氣管酚紅排泌量及大鼠毛細(xì)管排痰量(P<0.05或P<0.01

8、)。
　　 結(jié)論：
　　 1、浙貝止咳顆粒體外對(duì)金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌有抑制作用，并且對(duì)細(xì)菌引起小鼠死亡有一定的保護(hù)作用，說(shuō)明該藥具有一定的抗菌作用。
　　 2、浙貝止咳顆粒能有效地抑制甲型H1N1流感病毒在MDCK細(xì)胞和雞胚成纖維細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制，并且能改善流感病毒引起的小鼠肺炎癥狀，延長(zhǎng)感染流感病毒小鼠的生存率，降低死亡率，因此在抗病毒方面，該藥可能是一種有應(yīng)用價(jià)值的有效藥