化濁解毒和胃方對(duì)胃癌前病變大鼠胃粘膜PCNA及PTEN表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀察化濁解毒和胃方對(duì)胃癌前病變大鼠一般狀況、胃粘膜病理組織學(xué)、胃粘膜增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、磷酸酶抑癌基因(PTEN)的影響，從抑制細(xì)胞過(guò)度增殖方面探討化濁解毒和胃方防治胃癌前病變的可能作用機(jī)制，并為進(jìn)一步研究化濁解毒和胃方奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：將80只清潔級(jí)6周齡健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為2組：正常對(duì)照組12只、造模組68只。造模組大鼠采用綜合造模法造模，共24周。造模成功后，將剩余56只大鼠按照隨機(jī)原則

2、分為5組：模型對(duì)照組12只、維甲酸組、化濁解毒和胃方高、中、低劑量組，各11只。開始進(jìn)行治療：中藥高、中、低劑量組分別按22、11.5、5.5g/kg灌胃2、1、0.5g/ml濃度的化濁解毒和胃方湯劑；維甲酸組按40ml/kg灌胃；正常組、模型組每日灌胃相應(yīng)量的生理鹽水；每日1次，連續(xù)16周。末次給藥后禁食、水24小時(shí)，稱重，麻醉后處死。留取胃標(biāo)本做以下指標(biāo)測(cè)定：胃粘膜大體觀、胃粘膜組織光鏡下觀察、免疫組化法檢測(cè)各組大鼠胃粘膜組織PCN

3、A、PTEN的表達(dá)。計(jì)量資料用（(?)±s）表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：(1)一般狀況：各治療組均可以改善GPL大鼠的毛色、精神狀態(tài)、食欲、大便、活動(dòng)、體重及存活率，但以化濁解毒和胃方高劑量組改善明顯。(2)胃粘膜肉眼觀察：正常組胃粘膜表面光滑，呈粉紅色，粘膜皺襞規(guī)整；模型組粘膜粗糙，呈灰白色，可見點(diǎn)、片狀出血，部分區(qū)域皺襞低平或消失，此外可見糜爛、潰瘍及增生結(jié)節(jié)

4、等病變。維甲酸組和中藥治療組可以改善胃粘膜病變，中藥高劑量組胃粘膜大部分接近正常。(3)胃粘膜光鏡觀察：正常組胃粘膜厚度正常，上皮細(xì)胞完整，腺體排列規(guī)整，偶見炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。模型組胃粘膜呈多灶性萎縮變薄，上皮細(xì)胞變性、壞死甚或脫落，腺體不同程度的萎縮或消失，可見中-重度異型增生并伴腸化生，粘膜肌層增厚，間質(zhì)內(nèi)有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。中、高劑量組可見胃粘膜厚度適中，上皮細(xì)胞無(wú)明顯變性壞死，腺體排列較規(guī)則，間質(zhì)有少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。與模型組相比，各

5、治療組胃粘膜腸化、異型增生均有不同程度的改善，以中、高劑量組改善最為明顯（P＜0.05）。(4)PCNA:正常組胃粘膜表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞較少，著色淺；模型組大部分細(xì)胞表達(dá)陽(yáng)性，且強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞多，濃染呈棕黃色；中藥治療組強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞較少。模型組PI值明顯高于其他各組（均P＜0.05）；中藥高劑量組PI值低于維甲酸組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；中、低劑量組與維甲酸組比較差異不明顯(P＞0.05)。(5)PTEN：正常組胃粘膜可見大量染成棕黃色

6、的陽(yáng)性細(xì)胞，PTEN蛋白平均陽(yáng)性表達(dá)率100％；模型組平均陽(yáng)性表達(dá)率最低，為25.0％；各治療組陽(yáng)性表達(dá)率與模型組比較，均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；中藥高、中劑量組PTEN陽(yáng)性表達(dá)率高于其他治療組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），低劑量組與維甲酸組比較差異不明顯(P＞0.05)。(6)PTEN陽(yáng)性率與PI值的相關(guān)分析：r=-0.6032，P＜0.05，提示PTEN基因蛋白與PCNA蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性，即伴隨著PTEN蛋白表達(dá)