樹(shù)突狀細(xì)胞疫苗調(diào)節(jié)荷瘤大鼠Th1-Th2平衡及抑制腫瘤生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:建立Walker-256大鼠種植瘤模型，研究DC疫苗能否調(diào)節(jié)荷瘤大鼠Th1/Th2平衡及抑制腫瘤生長(zhǎng)。 方法:從大鼠骨髓細(xì)胞中利用粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)和白細(xì)胞介導(dǎo)素4(IL-4)在體外定向誘導(dǎo)分化出DC，以液氮凍融法制備腫瘤抗原刺激DC制備腫瘤疫苗。選取25只雌性SD大鼠，在皮下注射Walker-256腫瘤細(xì)胞。10天后，將已經(jīng)成瘤的大鼠按照體重配對(duì)，隨機(jī)分為治療組和腫瘤組，另外選取10只體重分別相同

2、的雌性SD大鼠作為對(duì)照組。治療組大鼠皮下注射負(fù)載Walker-256腫瘤細(xì)胞抗原的樹(shù)突狀細(xì)胞懸液，腫瘤組和對(duì)照組大鼠則皮下注射等量PBS。分別檢測(cè)大鼠血細(xì)胞因子(包括IL-12、IFN-γ、IL-4和IL-10)和腫瘤最大徑。 結(jié)果:(1)得到大量具備典型光鏡和電鏡形態(tài)特征的DC，表達(dá)大鼠DC特異性標(biāo)志OX62。(2)負(fù)載抗原前后的DC產(chǎn)生IL-12的水平存在明顯差異(P<0.05)。(3)DC腫瘤疫苗能誘導(dǎo)顯著的抗腫瘤免疫效應(yīng)

3、，治療組終末腫瘤最大徑顯著小于對(duì)照組(P<0.01)。(4)Walker-256腫瘤細(xì)胞能夠造成大鼠Th1/Th2失衡。腫瘤組與對(duì)照組比較，IL-12明顯下降(P<0.05)，IFN-γ明顯下降(P<0.05)，IL-10明顯上升(P<0.05)。以IFN-γ/IL-4代表Th1/Th2，腫瘤組與對(duì)照組比較明顯下降(P<0.05)，說(shuō)明腫瘤組大鼠發(fā)生了Th1/Th2失衡。(5)DC腫瘤疫苗能夠調(diào)節(jié)荷瘤大鼠的Th1/Th2平衡。治療組與腫

4、瘤組比較，IL-12明顯上升(P<0.01)，IFN-γ明顯上升(P<0.01)，IL．4明顯下降(P<0.01)，IL-10則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以IFN-γ/IL-4代表Th1/Th2，治療組與腫瘤組比較明顯上升(P<0.05)，說(shuō)明Th1/Th2失衡的狀態(tài)已經(jīng)有效逆轉(zhuǎn)。 結(jié)論: Walker-256腫瘤細(xì)胞能夠造成大鼠Th1/Th2失衡。Walker-256抗原致敏的DC腫瘤疫苗具有高效抗腫瘤作用，并能夠調(diào)節(jié)大鼠Th1/Th2平