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文檔簡介
1、目的:觀察骨骼肌衛(wèi)星細胞種植對在體失神經(jīng)骨骼肌萎縮的影響.研究肌衛(wèi)星細胞對萎縮肌肉的作用,為臨床提高治療失神經(jīng)肌萎縮的療效提供實驗依據(jù).方法:采用I型膠原酶和胰蛋白酶兩步消化法獲取大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞,不連續(xù)密度梯度離心法純化后,體外原代培養(yǎng),并運用頻繁傳代的方法獲取足量單個肌衛(wèi)星細胞.利用免疫細胞化學染色對所獲取的細胞進行鑒定,為移植做準備.取成年SD大鼠共32只雌雄不限,隨機分為2組,對照組與實驗組各16只,兩組均采用切斷大鼠右后肢坐
2、骨神經(jīng)造成1cm神經(jīng)缺損,形成失神經(jīng)支配腓腸肌的動物模型.實驗組與對照組分別取肌衛(wèi)星細胞懸液,生理鹽水各0.2ml,注入失神經(jīng)支配腓腸肌內,移植前一天以0.02％濃度4′-6-二脒基-2-苯吲哚(DAPI)熒光標記肌衛(wèi)星細胞過夜.實驗后2周、8周時取雙側腓腸肌測定肌濕重,然后行肌動蛋白免疫組織化學染色及HE染色,并作圖像分析測定肌纖維橫截面積及肌動蛋白的表達量,數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS10.0軟件處理,進行兩組樣本均數(shù)比較t檢驗.結論:肌衛(wèi)星細胞
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