骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞成肌分化的研究.pdf

1、心肌梗塞疾病是長期困擾醫(yī)學(xué)界的難題,因為心肌壞死后不能再生,損傷心肌的修復(fù)是由成纖維細(xì)胞完成的.人們正在探索的干細(xì)胞移植技術(shù),為病損心臟的細(xì)胞重建及衰竭心臟的功能恢復(fù),提供了一種全新的治療策略.研究表明移植后的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)和骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞可以在心梗壞死區(qū)向心肌分化.體外實驗也發(fā)現(xiàn)在特定的誘導(dǎo)因子作用下MSCs可向心肌細(xì)胞分化.該實驗初步探討5-氮胞苷體外誘導(dǎo)MSCs向心肌分化

2、的最佳條件和體外分化的過程,骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外分化的過程以及N-ACh受體表達(dá),為進(jìn)一步研究細(xì)胞在體移植或臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù).第一部分:體外培養(yǎng)Sprague-Dawley(SD)大鼠的MSCs,反復(fù)傳代至P3、P6或P12;用5-氮胞苷誘導(dǎo),比較不同誘導(dǎo)濃度組、不同誘導(dǎo)時間組和不同體重動物組MSCs的分化率,觀察誘導(dǎo)后細(xì)胞分化過程中形態(tài)學(xué)的動態(tài)變化,并且用cardiac troponin Ⅰ、desmin和α-sarcomeric

3、actin抗體鑒定分化的心肌樣細(xì)胞,α-銀環(huán)蛇毒素鑒定乙酰膽堿受體.第二部分:體外培養(yǎng)新生SD大鼠和雞胚的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞,差速貼壁法純化.觀察細(xì)胞體外分化過程,用α-sarcomeric actin、desmin和skeletal myosin抗體鑒定骨胳肌特異性蛋白的表達(dá).ACh刺激肌管收縮,并鑒定肌管表面的乙酰膽堿受體.總結(jié)二部分實驗結(jié)果,得到以下結(jié)論:1、MSCs經(jīng)10μmol/L濃度的5-氮胞苷體外誘導(dǎo)24h后易向心肌樣細(xì)胞分化