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文檔簡(jiǎn)介
1、鼻咽癌是一個(gè)多因素遺傳性腫瘤,其發(fā)生發(fā)展具有多階段性。遺傳因素與環(huán)境因素共同作用致使與鼻咽癌相關(guān)的多個(gè)基因發(fā)生改變,從而導(dǎo)致鼻咽癌的發(fā)生和發(fā)展。它是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,在頭頸部惡性腫瘤中占據(jù)首位。鼻咽癌在中國(guó)南方和國(guó)外中國(guó)南方移民及后裔中發(fā)病率極高,尤其是中國(guó)南方廣東省鼻咽癌發(fā)病率較歐美等其他地區(qū)高25~30倍。這種驚人的地域性和民族性特征使鼻咽癌的防、診、治在中國(guó)癌癥研究中具有特殊重要的位置。
Hedgehog(Hh
2、)信號(hào)通路是一個(gè)進(jìn)化保守的信號(hào)通路,在從低等動(dòng)物(果蠅)到高等動(dòng)物(人類)中普遍存在。Hh信號(hào)通路最初的功能是胚胎發(fā)育的組織者,隨后人們的研究又揭示了Hh在多種腫瘤的發(fā)生、分化、侵襲和轉(zhuǎn)移中起關(guān)鍵性作用。Hh信號(hào)通路的異常激活,顯著調(diào)節(jié)該通路下游目的基因的轉(zhuǎn)錄水平,可引起癌細(xì)胞的過(guò)度增殖和分化異常。在Hh信號(hào)通路中PTCH-1和SMO起著關(guān)鍵性的作用,Hh信號(hào)的接收和傳導(dǎo)由位于靶細(xì)胞膜上的PTCH和SMO控制。
本研究選擇
3、Hh信號(hào)通路的PTCH-1和SMO作為研究對(duì)象,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),檢測(cè)鼻咽癌組織中PTCH-1和SMO基因的表達(dá)水平,通過(guò)與鼻咽炎患者的鼻咽組織相比較,探討Hh信號(hào)通路與鼻咽癌發(fā)生之間的關(guān)系,以尋找鼻咽癌診斷和治療的生物標(biāo)志物。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在所檢測(cè)的全部鼻咽癌組織和鼻咽炎組織中PTCH-1和SMO都有表達(dá)。與鼻咽炎組織相比,有75%(24/32)鼻咽癌組織的PTCH-1基因表達(dá)水平下調(diào),有68.8%(22/32)鼻咽癌組織的
4、SMO表達(dá)水平上調(diào),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在鼻咽癌中SMO基因普遍具有較高的表達(dá)水平,PTCH-1基因的表達(dá)水平則相對(duì)較低,而SMO基因表達(dá)水平的上調(diào)及PTCH-1基因表達(dá)水平的下調(diào),可引起Hedgehog信號(hào)通路在鼻咽癌中的異常激活,Hedgehog信號(hào)通路的異常激活可能與鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程相關(guān)。
另外,在鼻咽癌CNE1和CNE2細(xì)胞株中,定性的檢測(cè)Hh信號(hào)通路PTCH-1和SMO基因的表達(dá),驗(yàn)證在所檢
5、測(cè)的鼻咽癌細(xì)胞株中有Hh信號(hào)通路的激活。用Hh信號(hào)通路特異性抑制劑cyclopamine,在不同劑量和時(shí)間上分別作用于低分化及高分化鼻咽癌細(xì)胞株,通過(guò)CCK-8比色法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的情況。CCK-8比色法的結(jié)果顯示,cyclopamine對(duì)CNE1和CNE2細(xì)胞有增殖抑制作用,且呈劑量和時(shí)間依賴性,其中劑量效應(yīng)關(guān)系較顯著。Cyclopamine劑量低于5μmol/L時(shí),對(duì)細(xì)胞抑制作用不明顯;當(dāng)劑量從5μmol/L增至40μmol/L
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