TGF-β3和MMP-11在大鼠模型子宮肌瘤中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:
　　 建立子宮肌瘤大鼠模型,為藥物篩選和發(fā)病機(jī)制研究提供動(dòng)物模型;通過(guò)檢測(cè)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(Transforming growth factor beta3,TGF-β3)和基質(zhì)金屬蛋白酶11(Matrixmetalloproteinases11,MMP-11)在模型子宮肌瘤中的表達(dá),來(lái)探討TGF-β3和MMP-11與子宮肌瘤發(fā)生的相關(guān)性。
　　 方法:
　　 1.建立動(dòng)物模型采取隨機(jī)數(shù)字表法將20只清潔

2、級(jí)未孕雌性SD大鼠(體重180±20g)隨機(jī)分成對(duì)照組和模型組,每組10只。對(duì)照組肌肉注射生理鹽水0.1 ml/只,隔日1次,連續(xù)9周。模型組采用雌孕激素負(fù)荷法,即先肌肉注射苯甲酸雌二醇0.1 ml/只,隔日1次,連續(xù)4周,再加注黃體酮0.1 ml/只,隔日1次,連續(xù)5周。每周定期稱量體重并記錄。
　　 2.9周后,所有大鼠禁食不禁水24小時(shí),用2％戊巴比妥鈉(40mg/kg)腹腔注射麻醉。解剖分離大鼠子宮,使之離體,肉眼觀察大

3、鼠子宮大體形態(tài)后拍照,稱重,計(jì)算子宮系數(shù)(子宮重量/體重)。
　　 3.取一部分對(duì)照組子宮組織和模型組子宮組織置于-80℃存放用于提取RNA,其余部分置于4%多聚甲醛液中固定,石蠟包埋,切片,HE染色后鏡下觀察大鼠子宮平滑肌病理改變。
　　 4.運(yùn)用RT-PCR和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)TGF-β3和MMP-11在對(duì)照組和模型組子宮組織中mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)差異。
　　 結(jié)果:
　　 1.模型組子宮重

4、量(1.980±0.420)、子宮系數(shù)(0.826±0.150)均比對(duì)照組子宮重量(0.696±0.150)、子宮系數(shù)(0.312±0.060)顯著性增大,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 2.模型組大鼠子宮體積較對(duì)照組大鼠子宮明顯增大、變形,肉眼可見腫脹、結(jié)節(jié)。HE染色結(jié)果也顯示,模型組大鼠子宮肌層明顯增厚,平滑肌排列紊亂,呈瘤樣改變。
　　 3.免疫組化結(jié)果顯示模型組TGF-β3的表達(dá)量((13.659±1

5、.341)×104)和MMP-11的表達(dá)量((14.621±0.647)×104)明顯大于對(duì)照組TGF-β3的表達(dá)量((3.841±0.821)×104)和MMP-11的表達(dá)量((3.781±0.619)×104),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 4.RT-PCR結(jié)果顯示TGF-β3和MMP-11在模型組大鼠子宮組織的mRNA水平的表達(dá)量明顯高于對(duì)照組大鼠子宮組織,與免疫組化染色結(jié)果一致。
　　 結(jié)論: