GRIM-1蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、研究背景:
　　 肺癌是當(dāng)今世界各國常見的惡性腫瘤，并已成為絕大多數(shù)國家癌癥死亡的主要原因，被認(rèn)為是目前對人類健康和生命威脅最大的惡性腫瘤。約70％的肺癌患者在發(fā)現(xiàn)時(shí)已屬中、晚期，如能早期發(fā)現(xiàn)可以使患者的5年生存率明顯提高。由于肺癌早期或癌前病變時(shí)已發(fā)生多種基因異常，這些異常改變往往先于臨床癥狀的出現(xiàn)，并在一定程度上成為早期肺癌的分子標(biāo)志物。干擾素/維甲酸聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡相關(guān)的基因(genes associated with

2、 retinoid-IFN-induced mortality，GRIMs) 是新的凋亡相關(guān)基因家族,它是一組由 IFN-β聯(lián)合 RA 誘導(dǎo)表達(dá)的新的細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)因子，是1998年由Hofmann et al應(yīng)用反義基因敲除的方法分離發(fā)現(xiàn)的。維甲酸/干擾素誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因-1（GRIM-1）是一個新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)基因，編碼一種分子量為64kD的新蛋白質(zhì)，參與干擾素和維甲酸誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)。GRIM-1的等位基因SHQ-1是sn

3、oRNA的重要組成部分，SHQ-1是作為酵母H/ACA RNP裝配因子shq1p在人類中的相似物被首次發(fā)現(xiàn)的，其在H/ACA核仁RNP和端粒酶RNP的生物合成中起著重要的作用。而對肺癌組織中 GRIM-1 蛋白表達(dá)水平的研究，國內(nèi)外尚未有報(bào)道。本研究采用免疫組化法檢測33例非小細(xì)胞肺癌組織中GRIM-1蛋白的表達(dá)，Western blot 檢測31例非小細(xì)胞肺癌組織中GRIM-1蛋白表達(dá)水平，分析GRIM-1蛋白水平的表達(dá)與臨床病理特征

4、之間的關(guān)系，并進(jìn)一步探討GRIM-1在肺癌發(fā)生發(fā)展中的意義。
　　 目的:
　　 本研究以人肺癌組織及癌旁組織為材料,檢測GRIM-1蛋白在支氣管肺癌組織及癌旁組織中表達(dá)的不同；同時(shí)檢測GRIM-1蛋白在肺癌組織細(xì)胞內(nèi)的定位；并分析GRIM-1蛋白水平的表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系,以期探討GRIM-1在肺癌發(fā)生發(fā)展中的意義。
　　 方法:
　　 1.免疫組化抗生物素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物法（SABC

5、）檢測肺癌和炎癥肺組織GRIM-1蛋白的表達(dá)選用手術(shù)切除取得的33例肺癌組織和相應(yīng)癌旁組織，采用免疫組化抗生物素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物法（SABC）檢測GRIM-1蛋白的表達(dá)。
　　 2.用 Western blot 法檢測31例肺癌組織中GRIM-1蛋白表達(dá)情況分別抽取31例患者（另有兩例因組織蛋白降解未予使用）肺癌組織及癌旁組織中的總蛋白，采用Western Blot 法分別檢測GRIM-1蛋白表達(dá)的變化。
　　

6、 3.分析肺癌組織中GRIM-1蛋白水平的表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系將肺癌組標(biāo)本GRIM-1蛋白的表達(dá)按性別、年齡、吸煙指數(shù)、原發(fā)灶分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及臨床病理分期等參數(shù)進(jìn)行分組，分析GRIM-1蛋白的表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)整理和分析應(yīng)用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用c2 檢驗(yàn)、Fisher 精確概率法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)分析，多樣本比

7、較采用單因素方差分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.GRIM-1在癌旁組織和肺癌組織中的表達(dá)采用免疫組化法檢測發(fā)現(xiàn)：GRIM-1蛋白在癌旁組織肺泡上皮細(xì)胞呈強(qiáng)陽性表達(dá)，在鱗癌、腺癌組織中呈相對不同程度的低表達(dá)，肺癌組織中GRIM-1蛋白的表達(dá)主要定位于細(xì)胞漿中。
　　 2.肺癌組織中GRIM-1蛋白的表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系將肺癌組 33例臨床標(biāo)本 GRIM-1 蛋白的表達(dá)陽性率

8、按組織學(xué)類型、臨床病理分期、性別、年齡、吸煙指數(shù)、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移等參數(shù)進(jìn)行分組，GRIM-1蛋白在I、II期肺癌患者中的表達(dá)陽性率（84.21％）顯著高于III、IV期患者中的表達(dá)陽性率（35.71％），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），GRIM-1 蛋白表達(dá)的陽性率在不同臨床分期的肺癌患者中表達(dá)有顯著差異（P＜0.01），但與肺癌的組織類型、有無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度以及患者的性別、年齡及吸煙指數(shù)無關(guān)（P＞0.05）。
　　

9、 3.肺癌及癌旁組織GRIM-1蛋白水平檢測Western Blot 結(jié)果表明：肺癌組與癌旁組相比，GRIM-1蛋白表達(dá)水平有明顯差異；肺癌組GRIM-1蛋白水平低于其在相對應(yīng)的癌旁組的表達(dá)，與臨床資料之間的相關(guān)分析沒有明顯的差異性。
　　 結(jié)論:
　　 GRIM-1蛋白在肺癌組織和癌旁組織中均有不同程度表達(dá)，在癌旁組織中的表達(dá)陽性率高于肺癌組織的表達(dá)。GRIM-1 蛋白表達(dá)的陽性率在不同臨床分期的肺癌患者中表達(dá)有顯著差