水溶性CdTe量子點的生物標(biāo)記及其生物應(yīng)用.pdf

1、本論文探討了本實驗室自行合成的水溶性CdTe量子點作為一種新型的熒光納米探針材料在生物應(yīng)用方面的可能性，研究內(nèi)容主要包括CdTe量子點與蛋白分子的共價連接; 量子點-蛋白標(biāo)記物的純化和表征; 采用直接熒光免疫法，對固定和活的人臍靜脈內(nèi)皮細胞膜上、細胞質(zhì)內(nèi)的靶分子進行了特異性細胞成像。 在水相CdTe量子點標(biāo)記各種蛋白分子的實驗中，我們系統(tǒng)的優(yōu)化了量子點濃度、EDC濃度、蛋白濃度、反應(yīng)時間等標(biāo)記條件。成功用EDC一步法連接量子點

2、和各種蛋白分子,其中蛋白分子包括了一般的非特異性牛血清蛋白BSA、糖蛋白荊豆凝集素UEA-1以及抗體anti-vWF。第一次運用激光誘導(dǎo)熒光的毛細管電泳對量子點的標(biāo)記產(chǎn)物進行了分析。同時采用超濾離心裝置對標(biāo)記產(chǎn)物進行了純化分離，達到了去除未結(jié)合蛋白的量子點以及除鹽濃縮的效果。我們通過激光誘導(dǎo)熒光的毛細管電泳的表征手段證明：標(biāo)記蛋白的含量高達96％。用離心超濾方法純化標(biāo)記產(chǎn)物的效果也很明顯，通過純化，QD-BSA的含量從43.6％提高到了

3、97.1％，QD-UEA-1的含量從68.8％提高到了82.5％。 在將量子點的蛋白標(biāo)記物應(yīng)用到細胞成像的研究中，我們建立了一套量子點作為熒光探針用于固定細胞和活細胞的成像的方法,并對我們合成的水相CdTe量子點潛在的應(yīng)用價值進行了探索。實驗結(jié)果顯示：熒光探針QD-UEA-1能夠特異性標(biāo)記經(jīng)過固定處理的或活的人臍靜脈內(nèi)皮細胞的細胞膜上的靶分子L-fucose；熒光探針QD-anti-vWF也特異性地標(biāo)記了固定處理過的人臍靜脈內(nèi)皮