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1、目的:研究人胚胎結(jié)腸神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育過程中神經(jīng)生長因子(NerveGrowthFactor,NGF)與其兩個受體TrkA(tyrosinekinaseA)、P75NTR(NerveGrowthFactorlowaffinityreceptorP75)在結(jié)腸神經(jīng)系統(tǒng)中的分布及與結(jié)腸神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的關(guān)系。 方法:采用一抗為PGP9.5(proteingeneproduct9.5)、NGF、TrkA、P75NTR的免疫組化技術(shù),顯示結(jié)腸神
2、經(jīng)系統(tǒng)不同發(fā)育階段腸壁中的神經(jīng)元。 結(jié)果:人胚胎發(fā)育有明顯的階段性,在不同的階段神經(jīng)生長因子(NGF)、高親和力受體TrkA、低親和力受體P75NTR在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)水平不同。在胚胎發(fā)育早期(胎齡4個月以前),腸壁發(fā)育差,以后出現(xiàn)菲薄的平滑肌層和低平的腸粘膜,偶見NGF免疫反應(yīng)性神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞;至發(fā)育中期(胎齡4-5個月),腸壁分化出4層結(jié)構(gòu),出現(xiàn)相當(dāng)發(fā)達(dá)絨毛,NGF、TrkA、P75NTR、PGP9.5免疫反應(yīng)性細(xì)胞明顯增多,
3、彌散分布于整個肌層間并逐漸遷移到粘膜下層和粘膜層;至發(fā)育晚期(6-9個月),腸壁各層均增厚,肌間神經(jīng)叢成簇分布,神經(jīng)纖維構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)出現(xiàn)更為細(xì)小的3級突起,粘膜下神經(jīng)叢分化形成淺叢和深從NGF在胞漿、突起,TrkA在胞漿、胞膜、胞核上,PGP9.5在胞漿上著色進一步加深,免疫反應(yīng)進一步增強P75NTR免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞數(shù)增多但著色深淺并無明顯變化,染色強度變化不大。 結(jié)論:結(jié)腸神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育有明顯的階段性。在發(fā)育早期未見NGF、Tr
4、kA、P75NTR、PGP9.5免疫反應(yīng)性神經(jīng)細(xì)胞;在發(fā)育中期NGF、TrkA、P75NTR、PGP9.5神經(jīng)成分在腸壁各層中出現(xiàn)并發(fā)育增生;晚期腸壁各層神經(jīng)成分分化成熟,NGF、TrkA、PGP9.5染色強度進一步增強,但P75NTR染色強度變化不大;在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育不同階段,NGF、TrkA與P75NTR比例在發(fā)生變化,在不同的發(fā)育階段P75NTR和NGF、TrkA相互作用發(fā)揮不同的生理學(xué)效應(yīng),而在不同的發(fā)育階段,原始病因引起NGF、
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