水牛DGAT1基因的克隆及SNP分析.pdf

1、甘油二脂?；D移酶(DGAT1)是控制甘油三脂合成的關鍵酶。近年來DGAT1基因被鑒定出來，被認為是奶牛乳脂率的一個重要的功能候選基因。本實驗利用奶牛DGAT1基因序列設計引物，從水牛基因組中反復連續(xù)擴增，測序，首次獲得水牛DGAT1基因的基因組序列(GenBank注冊號為AY999090)?；蛉L12.7Kb，包括3.5Kb的5'調控區(qū)和568bp的3'調控區(qū)。序列同源性比較發(fā)現(xiàn)，水牛DGAT1基因的編碼區(qū)序列與奶牛、豬、人、鼠的c

2、DNA編碼區(qū)序列分別有98％、91％、84％、82％的同源。編碼的蛋白序列與奶牛、豬、人、鼠的蛋白序列分別有98％、91％、85％、82％的同源。設計了16對引物檢測水牛DGAT1基因的多態(tài)，覆蓋全部外顯子，利用單鏈構象多態(tài)(PCR-SSCP)分析的方法。在120頭水牛中檢測到了7個SNPs，其中一個位于第17外顯子中引起氨基酸殘基的改變：丙氨酸(GCG)→纈氨酸(GTG)。其余6個SNPs均位于內含子中。本實驗還對牦牛的DGAT1基因