葛根素對極低頻電磁場引起的鞏膜病理改變的作用.pdf

1、目的：
　　研究葛根素對極低頻電磁場（ELF-EMFs）引起的豚鼠鞏膜及體外培養(yǎng)的人胚胎眼鞏膜成纖維細胞（HFSFs）病理改變的作用。
　　方法：
　　利用自制的穩(wěn)定可調(diào)的模擬生活輻照磁場的 ELF-EMFs系統(tǒng)分別對出生1周的豚鼠和體外培養(yǎng)的HFSFs進行輻照，同時給予葛根素干預。
　　記錄豚鼠在實驗0、2、4、8周時屈光度和眼軸長度，實驗結(jié)束時處死豚鼠，對其眼后極部鞏膜進行 HE染色光學顯微鏡檢查和透射電子顯

2、微鏡檢查。
　　MTT法檢測HFSFs經(jīng)ELF-EMFs（0.2mT，50Hz）輻射0、12、24、48h后的增殖活性，以及 ELF-EMFs（0.2mT，50Hz，24h）與不同濃度葛根素（0?M、0.1?M、1?M、10?M）同時干預下HFSFs增殖活性；實時熒光定量PCR（Real-time PCR）法檢測ELF-EMFs（0.2mT，50Hz，24h）作用下不同濃度葛根素組HSFs內(nèi)COL1A1和 MMP-9 mRNA轉(zhuǎn)錄

3、水平；蛋白印跡法（Western Blot）檢測ELF-EMFs（0.2mT，50Hz，24h）作用下不同濃度葛根素組 HFSFs內(nèi)COL1A1和MMP-9蛋白表達量。
　　結(jié)果：
　　與對照組相比，輻射組豚鼠在經(jīng)過ELF-EMFs輻照4周后，屈光度下降幅度和眼軸增長幅度變化明顯(P<0.05)，輻照時間越長變化越明顯，而葛根素干預后豚鼠屈光度下降幅度和眼軸增長幅度減小。HE染色光鏡檢查與電鏡檢查結(jié)果顯示 ELF-EMFs作

4、用下豚鼠鞏膜膠原纖維排列紊亂、變形，小直徑纖維數(shù)量增多，而葛根素干預下變化明顯減輕。
　　體外培養(yǎng)的HFSFs經(jīng)ELF-EMFs(0.2mT、50Hz)作用24小時后，增殖活性開始降低，COL1A1表達下調(diào)，而MMP-9表達上調(diào)；1?M起葛根素可使ELF-EMFs(0.2mT、50Hz、24h)作用下HFSFs增殖活性增強，0.1?M起葛根素可使HFSFs內(nèi)COL1A1蛋白表達和mRNA轉(zhuǎn)錄上調(diào)，而MMP-9蛋白表達和mRNA轉(zhuǎn)錄