極低頻電磁場對眼鞏膜及成纖維細(xì)胞的作用.pdf

1、目的:研究日益廣布的極低頻電磁場（ELF-EMFs）對豚鼠眼球與其后極部鞏膜和人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞(HFSFs)的作用以及葛根素對受輻射HFSFs的保護(hù)作用。
　　方法:自制模擬日常的ELF-EMFs輻照系統(tǒng)，研究分三部分進(jìn)行。
　　第一部分：ELF-EMFs對豚鼠眼球的影響。
　　將豚鼠置于ELF-EMFs中接受輻射，在作用的0、2、4、8周檢測其眼球屈光度、眼軸長度，對眼后極部鞏膜行光鏡和電鏡檢查。
　　第

2、二部分：ELF-EMFs對HFSFs的作用。
　　將HFSFs置于ELF-EMFs中培養(yǎng)。檢測HFSFs形態(tài)學(xué)和細(xì)胞增殖活力變化。用Real Time PCR方法測定HFSFs的Ⅰ型膠原蛋白(COL1A1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-2(TIMP-2)、轉(zhuǎn)化生長因子beta-2(TGFβ-2)、成纖維細(xì)胞生長因子-2(FGF-2)的mRNA表達(dá)。通過間接免疫熒光和western blot法檢查C

3、OL1A1和MMP-2在HFSFs中的表達(dá)。
　　第三部分：葛根素對ELF-EMFs引起的HFSFs病理改變的作用。
　　觀察葛根素對ELF-EMFs引起的HFSFs增殖活性、COL1A1和MMP-2表達(dá)變化的影響。
　　結(jié)果:
　　第一部分：
　　在經(jīng)過ELF-EMFs作用后，與對照組比較實驗組豚鼠眼軸增長幅度、屈光度下降幅度明顯(P<0.05)。結(jié)合光鏡與電鏡結(jié)果可知鞏膜纖維排列紊亂，小直徑纖維數(shù)量增多

4、，視網(wǎng)膜內(nèi)外核層在形態(tài)學(xué)上發(fā)生明顯變化，且其損傷程度與照射時間相關(guān)。
　　第二部分：
　　在ELF-EMFs(0.2mT、50Hz)作用24小時后，HFSFs的形態(tài)學(xué)發(fā)生變化，細(xì)胞呈不規(guī)則多邊形異常排列；HFSF細(xì)胞的增殖率在輻射后明顯降低。ELF-EMFs輻射后HFSFs的COL1A1、TIMP-2和FGF-2的mRNA表達(dá)水平明顯下降，MMP-2和TGFβ-2的mRNA表達(dá)水平明顯上調(diào)；輻射后COL1A1和MMP-2的蛋

5、白質(zhì)表達(dá)也有相應(yīng)的變化，即COL1A1蛋白明顯下降而MMP-2蛋白明顯增加(p<0.05)。
　　第三部分：
　　葛根素能夠減緩ELF-EMFs對HFSFs增殖的抑制作用，延阻ELF-EMFs使HFSFs內(nèi)COL1A1 mRNA和蛋白的表達(dá)下調(diào)、MMP-2 mRNA和蛋白表達(dá)上調(diào)的作用。
　　結(jié)論:
　　ELF-EMFs可促使豚鼠眼軸增長、屈光度負(fù)降，使豚鼠鞏膜和HFSFs發(fā)生形態(tài)學(xué)改變，是導(dǎo)致HFSFs增殖能力