有機(jī)肥施用對煙田土壤細(xì)菌多態(tài)性的影響.pdf

1、煙田土壤生態(tài)系統(tǒng)是煙草的品質(zhì)和產(chǎn)量的重要影響因素，然而土壤微生物多樣性對其調(diào)控起著至關(guān)重要的作用。本實(shí)驗(yàn)采樣傳統(tǒng)平板培養(yǎng)法與現(xiàn)代高通量測序技術(shù)從可培養(yǎng)微生物及分子生態(tài)兩方面探究不同施肥處理對煙田土壤細(xì)菌多樣性的影響。研究結(jié)果如下：
　　1.通過平板培養(yǎng)法分離純化出29株土壤細(xì)菌。統(tǒng)計(jì)分析不同有機(jī)肥處理土樣可培養(yǎng)細(xì)菌的多樣性指數(shù)，施加牛糞和秸稈可以增加煙田土壤中可培養(yǎng)細(xì)菌的數(shù)量及細(xì)菌種群豐富度，其中牛糞處理效果最為顯著；而施加有機(jī)肥

2、A和有機(jī)肥B兩種復(fù)合有機(jī)肥較常規(guī)化肥對煙田土壤可培養(yǎng)細(xì)菌的數(shù)量及種類的影響不明顯。
　　2.應(yīng)用Solexa基因組分析平臺，針對6種不同煙田施肥處理土壤，在7月、8月、9月三個(gè)時(shí)間，采集的18個(gè)煙田土壤樣品進(jìn)行測定分析，共獲得1727576條原始序列，220697個(gè)OTU，所有樣品OTU的覆蓋率均大于0.89，結(jié)合稀釋曲線，Shannon-Wiener曲線可得，本次測序數(shù)據(jù)可以客觀真實(shí)反映所提取土樣中細(xì)菌的種群結(jié)構(gòu)及差異性特征。<

3、br>　　3.由18個(gè)土壤樣品序列的Simpson指數(shù)和Shannon指數(shù)分析得：對煙田土壤施用有機(jī)肥可不同程度的影響煙田土壤樣品的Simpson指數(shù)和Shannon指數(shù)。不同有機(jī)肥的處理可以不同程度的影響土壤細(xì)菌的數(shù)量及物種豐富度。牛糞和發(fā)酵豆餅處理對煙田土壤細(xì)菌的群落豐富度影響最為顯著，有機(jī)肥A和有機(jī)肥B施用較常規(guī)化肥處理均呈現(xiàn)出良好的土壤細(xì)菌豐富度改變效應(yīng)，而秸稈有機(jī)肥對煙田土壤細(xì)菌群落豐富度影響較小。
　　4.采用RDP

4、classifier對序列進(jìn)行分類地位的鑒定，這些序列屬于酸桿菌綱（Acidobacteria）、放線菌綱(Actinobacteria）、擬桿菌綱(Bacteroidetes)、硝化螺旋菌綱(Nitrospira)、變形菌綱(Proteobacteria)等27個(gè)菌綱。其中酸桿菌綱(Acidobacteria)和放線菌綱(Actinobacteria)所占比例最大，分別為25.6％和22.7%。比例最高的前10個(gè)科分別為：鞘脂單胞菌科

5、(Sphingomonadaceae)、鏈霉菌科(Streptomycetaceae)、生絲微菌科（Hyphomicrobiaceae)、芽孢桿菌科（Bacillaceae)、鏈球菌科（Streptococcaceae)、紅色桿菌科（Rubrobacteraceae）、硝化螺菌科（Nitrospiraceae)、類諾卡氏菌科(Nocardioidaceae)、Koribacteraceae、Solibacteraceae。
　　5

6、.不同有機(jī)肥處理對土壤細(xì)菌菌群結(jié)構(gòu)影響顯著。對煙田土壤施加牛糞和發(fā)酵豆餅可顯著提高硝化螺菌屬（Nitrospira)和鏈霉菌屬（Streptomyces)在土壤細(xì)菌中所占比例；施加有機(jī)肥 A處理可以使煙田土壤中假絲酵母菌屬（Candidatus)、紅游動菌屬（Rhodoplanes）和鏈霉菌屬（Streptomyces)的比例顯著增加，而降低硝化螺菌屬（Nitrospira)和紅色桿菌屬（Rubrobacter)的比例；有機(jī)肥B和秸稈對