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文檔簡(jiǎn)介
1、煙田土壤生態(tài)系統(tǒng)是煙草的品質(zhì)和產(chǎn)量的重要影響因素,然而土壤微生物多樣性對(duì)其調(diào)控起著至關(guān)重要的作用。本實(shí)驗(yàn)采樣傳統(tǒng)平板培養(yǎng)法與現(xiàn)代高通量測(cè)序技術(shù)從可培養(yǎng)微生物及分子生態(tài)兩方面探究不同施肥處理對(duì)煙田土壤細(xì)菌多樣性的影響。研究結(jié)果如下:
1.通過平板培養(yǎng)法分離純化出29株土壤細(xì)菌。統(tǒng)計(jì)分析不同有機(jī)肥處理土樣可培養(yǎng)細(xì)菌的多樣性指數(shù),施加牛糞和秸稈可以增加煙田土壤中可培養(yǎng)細(xì)菌的數(shù)量及細(xì)菌種群豐富度,其中牛糞處理效果最為顯著;而施加有機(jī)肥
2、A和有機(jī)肥B兩種復(fù)合有機(jī)肥較常規(guī)化肥對(duì)煙田土壤可培養(yǎng)細(xì)菌的數(shù)量及種類的影響不明顯。
2.應(yīng)用Solexa基因組分析平臺(tái),針對(duì)6種不同煙田施肥處理土壤,在7月、8月、9月三個(gè)時(shí)間,采集的18個(gè)煙田土壤樣品進(jìn)行測(cè)定分析,共獲得1727576條原始序列,220697個(gè)OTU,所有樣品OTU的覆蓋率均大于0.89,結(jié)合稀釋曲線,Shannon-Wiener曲線可得,本次測(cè)序數(shù)據(jù)可以客觀真實(shí)反映所提取土樣中細(xì)菌的種群結(jié)構(gòu)及差異性特征。<
3、br> 3.由18個(gè)土壤樣品序列的Simpson指數(shù)和Shannon指數(shù)分析得:對(duì)煙田土壤施用有機(jī)肥可不同程度的影響煙田土壤樣品的Simpson指數(shù)和Shannon指數(shù)。不同有機(jī)肥的處理可以不同程度的影響土壤細(xì)菌的數(shù)量及物種豐富度。牛糞和發(fā)酵豆餅處理對(duì)煙田土壤細(xì)菌的群落豐富度影響最為顯著,有機(jī)肥A和有機(jī)肥B施用較常規(guī)化肥處理均呈現(xiàn)出良好的土壤細(xì)菌豐富度改變效應(yīng),而秸稈有機(jī)肥對(duì)煙田土壤細(xì)菌群落豐富度影響較小。
4.采用RDP
4、classifier對(duì)序列進(jìn)行分類地位的鑒定,這些序列屬于酸桿菌綱(Acidobacteria)、放線菌綱(Actinobacteria)、擬桿菌綱(Bacteroidetes)、硝化螺旋菌綱(Nitrospira)、變形菌綱(Proteobacteria)等27個(gè)菌綱。其中酸桿菌綱(Acidobacteria)和放線菌綱(Actinobacteria)所占比例最大,分別為25.6%和22.7%。比例最高的前10個(gè)科分別為:鞘脂單胞菌科
5、(Sphingomonadaceae)、鏈霉菌科(Streptomycetaceae)、生絲微菌科(Hyphomicrobiaceae)、芽孢桿菌科(Bacillaceae)、鏈球菌科(Streptococcaceae)、紅色桿菌科(Rubrobacteraceae)、硝化螺菌科(Nitrospiraceae)、類諾卡氏菌科(Nocardioidaceae)、Koribacteraceae、Solibacteraceae。
5
6、.不同有機(jī)肥處理對(duì)土壤細(xì)菌菌群結(jié)構(gòu)影響顯著。對(duì)煙田土壤施加牛糞和發(fā)酵豆餅可顯著提高硝化螺菌屬(Nitrospira)和鏈霉菌屬(Streptomyces)在土壤細(xì)菌中所占比例;施加有機(jī)肥 A處理可以使煙田土壤中假絲酵母菌屬(Candidatus)、紅游動(dòng)菌屬(Rhodoplanes)和鏈霉菌屬(Streptomyces)的比例顯著增加,而降低硝化螺菌屬(Nitrospira)和紅色桿菌屬(Rubrobacter)的比例;有機(jī)肥B和秸稈對(duì)
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