納米羥基磷灰石-膠原蛋白復(fù)合骨結(jié)合VEGF修復(fù)骨缺損的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 比較復(fù)合不同劑量血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor， VEGF)的納米羥基磷灰石/膠原蛋白復(fù)合骨(nano-hydroxyapatite/collagen，NHAC)修復(fù)骨缺損的效果，初步探討血管內(nèi)皮生長因子用于骨缺損修復(fù)的適宜劑量。
　　 方法：
　　 將納米羥基磷灰石粉末和膠原蛋白粉末按8：2的比例混合制備NHAC人工骨，再將混合粉末與含10n

2、g、100ng、300ngVEGF的蒸餾水按1：1.8的質(zhì)量比調(diào)和制備NHAC/VEGF人工骨。建立大鼠雙側(cè)橈骨0.5cm缺損動物模型30只，按隨機(jī)原則分為5組。以NHAC/10ngVEGF、NHAC/100ngVEGF、NHAC/300ngVEGF人工骨植入骨缺損處進(jìn)行修復(fù)作為實驗組，以NHAC人工骨植入組及空白組作為對照組。術(shù)后2、4、8周各組行組織學(xué)及免疫組織化學(xué)檢查，觀察材料早期血管化及成骨情況。
　　 結(jié)果：
　

3、　 組織學(xué)檢查NHAC/300ngVEGF組在膠原纖維、成骨細(xì)胞及骨小梁的生成情況方面好于其他實驗組和對照組，且NHAC組好于空白組。各時間點組織學(xué)評分以及血管計數(shù)均為NHAC/300ngVEGF人工骨組最高，于其他各組比較差異有顯著性意義(P＜0.05)。復(fù)合VEGF人工骨組在早期（2周）即有大量的血管生成，明顯多于NHAC組（P＜0.05）；隨著人工骨的降解，新生血管逐漸增多，因此在4周內(nèi)各組血管逐漸增多(P＜0.05)；而隨著新

4、生骨的改造，不成熟的毛細(xì)血管逐漸被少數(shù)主要血管取代，血管數(shù)量減少，所以復(fù)合VEGF人工骨組在第8周時血管數(shù)量減少。其中NHAC/300ngVEGF組血管數(shù)量在各實驗組各時間點最多。各實驗組血管數(shù)量在4周時達(dá)到高峰，而NHAC組血管數(shù)量在8周時最多。
　　 結(jié)論：
　　 血管內(nèi)皮生長因子能明顯促進(jìn)納米羥基磷灰石/膠原蛋白復(fù)合骨早期血管化及新骨形成，比單純應(yīng)用納米羥基磷灰石/膠原蛋白復(fù)合骨能更好的修復(fù)骨缺損，并且隨著VEGF

5、劑量的增加，新生血管數(shù)量和新骨形成量均相應(yīng)增加。正是由于血管的大量長入，使人工骨再血管化，從而為骨修復(fù)提供所需的間充質(zhì)細(xì)胞及成骨細(xì)胞，進(jìn)而促進(jìn)新生骨組織的形成。雖然本實驗表明隨著血管內(nèi)皮生長因子劑量的增加，血管生成數(shù)量及新骨形成量增加，但血管內(nèi)皮生長因子的劑量不能無限制增加，過大劑量的血管內(nèi)皮生長因子不但價格昂貴，而且可能會出現(xiàn)局部血管瘤形成、全身毒性反應(yīng)等并發(fā)癥。由于本研究僅為動物實驗結(jié)果，且僅進(jìn)行三個劑量的實驗，因而有效而安全的局部