甘薯莖線蟲的形態(tài)學(xué)及rDNA比較研究.pdf

1、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文甘薯莖線蟲的形態(tài)學(xué)及rDNA比較研究姓名：楊玉文申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物病理學(xué)指導(dǎo)教師：彭德良20050601A b s t r a c tM o r p h o l o g i c a l a n d m o l e c u l a ri d e n t i f i c a t i o n f o r t e ns w e a t p o t a t o s t e m n e m a t o d e p

2、 o p u l a t i o n sc o l l e c t e d f r o mB e i j n g , H e b e i ，S h a n d o n g , J i e n g s u ，A n h u ip r o v i n c e i n C h i n a w e r ec a r r i e d o u ti n t h i ss t u d y ．T h eI T S r e g i o n so f r

3、D N A w e r es c q u e n c e da n da n a l y z e d ，a n ds p e c i e s s p e c i f i c p r i m e r sW e r ed e s i g n e d ．S o m ei m p o r t a n t m o r p h o l o g i c a lc h a r a c t e r s w e r e o b s e r v e d w

4、i t h b o t h L i g h tM i c r o s c o p e a n dS c a n n i n g E l e c t r o n M i c r o s c o p e ( S E M ) a n dm o r p h o m e t f i c s W e r e m e a s u r e d ．I t r e v e a l e d t h a tt h es w e a t p o t a t o

5、s t e mn e m a t o d e i n C h i n a W a S i d e n t i c a lt ot h e D i t y l e n e h u sd e s t r u c t o r ．T h e a m p l i f i c a t i o no ft h er D N A - I T Sr e g i o n f r o me i g h ts w e c t p o t a t os t e

6、m n e m a t o d ep o p u l a t i o n so f D a x i n go f t h e B e i U n g c i t y , L u l o n g , F u n i n g ．Y i x i a n ，L u a n x i a n ，L u a n n a no f H e b e i p r o v i n c e ，P i n g y i no f S h e n d o n g p

7、 r o v i n c e a n dS i x i e no f A n h u i p r o v i n c e ( c o d e s D d l - D d 8 1 i n C h i n a e n d n m y c e f i o p h a g u sf r o mU K y i e l d e do n e s i n g l ef r a g m e n t o f a p p r o x i m a t e l

8、 y9 0 0 b p ，w h e r e a s t h e P C R p r o d u c t o f I T S f r o mt w os w e a t p o t a t os t e mn e m a t o d ep o p u l a t i o n sY i s h u io f S h a n d o I l gp r o v i n c ea n dT o n g s h a no f J i a n g

9、s up m v i n c e ( c o d e sD d 9 - D d l 0 ) i nC h i n aW a Sa b o u t1 2 0 0 b p ．R e s t r i c t i o n d i g e s t i o no f t h eI T Sw i t h 1 4e n z y m e s y i e l d e d i d e n t i c a l r e s t r i c t i o n p a

10、 t t e r n s f o r D d l —D d g ．R e s t r i c t i o n d i g e s t i o n p a t t e r n s w e r ei d e n t i c a lt oD d 9 a n d D d l 0 ．b u tD d 9 a n d D d l O c o u l db e d i s t i n g u i s h e d b y d i g e s t i o

11、 n o f d l u I a n d 兄，胡．T h eI T Sp r o d u c t sf r o ms w e e l p o t a t os t e r nn e m a t o d eo fC h i n aW e r e s e q u e n c e da n d a n a l y z e d ．I T Ss e q u e n c eo f D d l - D d 8 p o p u l a t i o n

12、so f s w e a t p o t a t os t e mn e m a t o d ef r o mC h i n a w a s7 2 7 b p ，w h e r e a st h e D d 9 - D d l 0i s o l a t e sW a Sa b o u t9 1 5 b p ．S e q u e n c ea l i g n m e n t s o ft h e I T Sr e g i o n o f

13、D d l - D d 8o fs w e e t D o t a t os t e m n e m a t o d e s f r o md i f f c r e t l t a r e ao f C h i n a s h o w e dl i t t l ev a r i a t i o n ．e n dt h eD d 9 - D d l 0p o p u l a t i o n p r e s e n t sm i n i

14、- d i f f e r e n c c ．I tW a S f o u n d t h a tt h e r ew e r ec l e a rs e q u e n c ed i f f e r e n c e s b a s e d o nI T S I r e g i o nb e t w e e nD d 9 a n d D d l O ．a(chǎn) n d t h e s i m i l a r i t yW e e o n l

15、y9 3 ．6 ％．T h i s i st h ef i r s tr e p o r ta b o u tt h em o l e c u l a r d a t ao f D ．d e s t u c t o rf r o m C h i n a , w h i c h s h o wh i g hs i m i l a r i t yt ot h a tf r o mE n g l a n d a n dU ．S ．A 。B a

16、 s e d o n t h e I T S s e q u e n c e , t h e s p e c i e s s p e c i f i c p r i m a r s o f s w e e t p o t a t o s t e m n e m a t o d ep o p u l a t i o n s i n C h i n aw e r ed e s i g n e d ．Am e t h o d f o rr a

17、 p i dm o l e c u l a rd i a g n o s i so f s w e e t p o 讎o s t e mn e m a t o d e b a s e d o n d u p l e x P C Rw i t h s p e c i e s s p e c i f i c p r i m e r w a s d e s c r i b e d ．1 1 p o p u l a t i o n so r i

18、 g i n a t i n g f r o m C h i n a a n dU K w e r e t e s t e db y d u p l e x P C R ．T h i si s t h e f i r s t s p e c i e ss p e c i f i cp r i m e ro fs w e a t p o t a t o s t e mn e m a t o d ei n C h i n a ．K e y

19、w n r d s ：s w e e t p o t a t o s t ℃' m n e m a t o d e ，m o r p h o l o g i c a l i d e n t i f i c a t i o n ，r D N A - I T S - R F L 只s p e c i e ss p e c i f i cp r i m e r , D i t y l e n c h u s d e s t r u c