松材線蟲(chóng)的形態(tài)學(xué)觀察及細(xì)菌對(duì)松材線蟲(chóng)表達(dá)的影響.pdf

1、松萎蔫病（Pine Wilt Disease）是由松材線蟲(chóng)[Bursaphelenchus xylophilus(Steiner&Buhrer) Nickle]引起一種松樹(shù)的毀滅性病害。近年來(lái)越來(lái)越多的研究表明，松材線蟲(chóng)攜帶的細(xì)菌在松萎蔫病的病理進(jìn)程中發(fā)揮著重要作用，松萎蔫病是由松材線蟲(chóng)與伴生細(xì)菌兩種病原共同作用引起的病害。因此，深入開(kāi)展松萎蔫病病原的檢測(cè)及兩種病原間協(xié)同作用研究，對(duì)于揭示松萎蔫病的致病機(jī)理具有重要的意義，同時(shí)也為松萎蔫

2、病的防治奠定理論基礎(chǔ)。
　　本文研究了4種染色劑對(duì)松材線蟲(chóng)的染色效果，結(jié)果表明，虎紅和水溶性苯胺蘭對(duì)松材線蟲(chóng)的染色效果好，蟲(chóng)體全身著色且著色較深，而亞甲基藍(lán)和結(jié)晶紫對(duì)松材線蟲(chóng)的染色能力較弱，只在頭部和尾部著色明顯。此外，本文初步研究了刀豆凝集素、麥胚凝集素和花生凝集素對(duì)松材線蟲(chóng)的作用，結(jié)果顯示，植物凝集素處理后，松材線蟲(chóng)初期均表現(xiàn)出活動(dòng)加強(qiáng)、幅度增大，部分線蟲(chóng)身體卷曲呈“S”狀或“8”字狀，部分線蟲(chóng)出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)

3、，松材線蟲(chóng)的死亡率逐漸上升，4.0 mg/mL的刀豆凝集素、麥胚凝集素和花生凝集素分別處理10 min，松材線蟲(chóng)的死亡率分別為100％、80%和65%。該研究為松材線蟲(chóng)的形態(tài)觀察及防治提供了參考。
　　為深入了解松材線蟲(chóng)攜帶菌在松萎蔫病中的作用，本文在轉(zhuǎn)錄組水平上研究了松材線蟲(chóng)攜帶的熒光假單胞菌GcM5-1A對(duì)無(wú)菌松材線蟲(chóng)基因表達(dá)的影響，結(jié)果顯示，與無(wú)菌松材線蟲(chóng)相比，攜帶熒光假單胞菌GcM5-1A的松材線蟲(chóng)有178個(gè)基因表達(dá)出現(xiàn)差

4、異，經(jīng)無(wú)參的BLAST比對(duì)發(fā)現(xiàn)有68個(gè)基因在數(shù)據(jù)庫(kù)中存在相似基因，在這個(gè)68個(gè)差異基因中有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的有6個(gè)，這6個(gè)基因中5基因呈上調(diào)表達(dá)，1個(gè)基因呈下調(diào)表達(dá)。5個(gè)上調(diào)表達(dá)的基因分別是lys-2（編碼溶菌酶）、sodh-1（編碼乙醇脫氫酶）、LOC100631470（編碼丙酮酸脫氫酶E1β亞基編碼基因）、PhyH(編碼植烷酰輔酶A雙加氧酶)和cyp-42A1（編碼細(xì)胞色素P450家族蛋白），1個(gè)下調(diào)的基因是sft-4,編碼SFT-4蛋白