兩種五加屬植物葉中抗HMGB1三萜活性成分研究.pdf

1、五加科五加屬植物，民間俗稱“五加皮”，大多有滋補(bǔ)、抗疲勞、抗風(fēng)濕、活血化淤等功效。前期研究表明該屬植物葉多含具有抗腫瘤、抗艾滋病毒、抗炎以及抗菌等活性的羽扇豆烷型三萜?；谖寮訉僦参镓S富的資源和在傳統(tǒng)醫(yī)藥領(lǐng)域上的廣泛應(yīng)用，本論文對(duì)細(xì)柱五加和糙葉五加兩種五加屬植物葉的活性成分分析、分離及抗炎活性進(jìn)行了系統(tǒng)研究。
　　 本論文首先綜述了天然產(chǎn)物中羽扇豆烷型三萜化合物的波譜特征，以期為該類化合物的研究開(kāi)發(fā)特別是結(jié)構(gòu)鑒定提供參考。

2、>　　 第二章采用現(xiàn)代分離分析技術(shù)，對(duì)細(xì)柱五加葉的化學(xué)成分進(jìn)行研究。經(jīng)熱甲醇提取、溶劑萃取、柱層析分離及重結(jié)晶等方法，從湖南產(chǎn)細(xì)柱五加葉的熱甲醇提取物中分離得到10個(gè)化合物。通過(guò)理化常數(shù)和各種波譜方法鑒定了他們的結(jié)構(gòu)，分別為羽扇豆烷型三萜化合物impressic acid(1),3α,11α-dihydroxy-23-oxo-lup-20(29)-en-28-oic acid(2)，3α，11α，23-trihydroxy-lup-2

3、0(29)-en-28-oic acid(3)，五加苷元(4),3-O-β-D-glucopyranosyl3α,11α-dihydroxylup-20(29)-en-28-oicacid(5), acantrifoside A(6), acankoreoside D(7), acankoreoside B(8)和五加苷(9)以及黃酮類化合物蘆丁(10)。其中化合物1～3和化合物5是首次從細(xì)柱五加中分離得到。
　　 論文第三章對(duì)

4、細(xì)柱五加中分離得到的9個(gè)羽扇豆烷型三萜化合物的細(xì)胞毒和抗HMGB1活性進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示所有化合物在濃度低于50μmol/L時(shí)基本無(wú)細(xì)胞毒性，且部分化合物對(duì)TNF-α、IL-1β和HMGB1有較好的抑制效果，在細(xì)柱五加葉中含量豐富，有望開(kāi)發(fā)新的抗HMGB1藥物，為治療重型肝炎、風(fēng)濕病提供直接藥物或先導(dǎo)物質(zhì)。
　　 在研究細(xì)柱五加葉中羽扇豆烷型三萜活性成分的基礎(chǔ)上，對(duì)同屬五加屬的糙葉五加葉進(jìn)行了系統(tǒng)研究。首先，采用DPPH法對(duì)糙

5、葉五加葉不同極性部位的抗氧化活性進(jìn)行了研究，其抗氧化能力大小為乙酸乙酯＞正丁醇＞石油醚，抗氧化活性可能來(lái)自糙葉五加葉中的多酚、黃酮、綠原酸等化合物。其次，首次建立了同時(shí)檢測(cè)糙葉五加葉中槲皮素和山柰酚的HPLC定量分析方法。采用RP-HPLC，色譜柱為AT.LICHROM ODS-C18柱(250×4.6 mm,5μm)，以MeOH∶ H3PO4∶H2O(50∶0.2∶49.8)為流動(dòng)相，柱溫30℃，流速1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)36

6、0 nm，進(jìn)樣量10μL。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，所建立的HPLC穩(wěn)定性好、準(zhǔn)確性高，適用于糙葉五加中槲皮素和山柰酚的定量分析。同時(shí)，對(duì)糙葉五加中的槲皮素、山柰酚、金絲桃苷和蘆丁進(jìn)行了含量測(cè)定。最后，經(jīng)溶劑提取、萃取、柱層析分離、重結(jié)晶等方法，從湖南產(chǎn)糙葉五加葉中分離得到一個(gè)油狀物和10個(gè)單體化合物。采用現(xiàn)代波譜手段及與已知化合物的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)比較，分別鑒定為有機(jī)酸類化合物三十烷酸(12)，三十二烷酸(13)，三十四烷酸(14)，棕櫚酸(16);甾體

7、類化合物豆甾醇(15)和胡蘿卜苷(17)，黃酮類化合物槲皮素(18)、山柰酚(19)、金絲桃苷(20)和蘆丁(21)。以上化合物均為首次從糙葉五加中分離得到。
　　 本論文的研究結(jié)果對(duì)從五加屬植物中尋找更多新的三萜活性物質(zhì)、細(xì)柱五加和糙葉五加的綜合利用開(kāi)發(fā)、以及植物化學(xué)分類學(xué)提供了重要的理論依據(jù);為開(kāi)發(fā)新的抗HMGB1藥物及治療重型肝炎、風(fēng)濕病的直接藥物或先導(dǎo)物質(zhì)提供了重要的研究基礎(chǔ);為羽扇豆烷型三萜活性及構(gòu)效關(guān)系研究提供新的理