細(xì)柱五加葉及其同屬植物活性成分研究.pdf

1、五加科(Araliaceae)五加屬(Acanthopanax Miq.)植物在全世界約有37種，主要分布于亞洲的中國(guó)、韓國(guó)和日本，其根皮為民間常見中藥，俗稱“五加皮”，具有滋補(bǔ)、抗風(fēng)濕、抗疲勞、活血化淤等功效，臨床主要用于治療風(fēng)濕痹痛、腰膝酸軟等病癥。我國(guó)的五加屬植物資源豐富，有26種18變種，《中國(guó)藥典》收載的五加皮為細(xì)柱五加(Acanthopanax gracilistylus W.W.Smith)根皮。韓國(guó)己發(fā)現(xiàn)五加屬植物11種

2、3變種3變型，《韓國(guó)藥典》收載的五加皮為無梗五加(Acan-thopanax sessiliflorum Seemann)根皮。由于五加屬植物豐富的資源以及在醫(yī)藥領(lǐng)域上的廣泛應(yīng)用，為了尋找更多新的活性成分，擴(kuò)大其藥用價(jià)值，本論文對(duì)細(xì)柱五加葉及其同屬植物中的活性成分(三萜、二萜及揮發(fā)油)進(jìn)行了系統(tǒng)研究。 五加屬植物中的三萜化合物大多具有生物活性，為了篩選抗HMGB1藥物，對(duì)湖南省長(zhǎng)沙地區(qū)細(xì)柱五加葉中的三萜成分進(jìn)行研究。將其熱甲醇提

3、取物經(jīng)Diaion HP-20P柱層析分離，其中100％和80％MeOH部分再經(jīng)硅膠柱層析、Sephadex LH-20柱層析、TLC及重結(jié)晶等方法分離得到6個(gè)化合物?；衔?～5采用EI-MS、HR-MS、1D-NMR、2D-NMR、IR以及與已知化合物的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)比較，鑒定為羽扇豆烷型三萜化合物acankoreanogenin A、acankoreoside B和acankoreoside A。其中化合物1為acankoreanoge

4、nin A，化合物2為acankoreanogenin A，化合物3為acankoreoside B(首次從該植物中得到)，化合物4為acankoreanogenin A，化合物5為acankoreoside A。化合物6經(jīng)GC-MS定性分析，主要為鄰苯二甲酸二丁酯等酯類成分。對(duì)分離產(chǎn)物acankoreanogenin A和acankoreoside A進(jìn)行抗HMGB1活性研究，結(jié)果顯示二者均有一定的抗炎活性，acankoreanoge

5、nin A對(duì)HMGB1有較好的抑制效果，有望成為一種新型抗HMGB1藥物，此發(fā)現(xiàn)為該植物的深入開發(fā)利用提供了有利依據(jù)。 研究表明五加皮中的二萜化合物是其有效成分之一，被證實(shí)具有較好的抗炎功能。對(duì)細(xì)柱五加根皮的乙醚提取物進(jìn)行多次硅膠柱層析及制備薄層層析，從中分離得到兩個(gè)抗炎二萜，經(jīng)鑒定化合物7為五加酸(acanthoic acid)，化合物8為貝殼烯酸(kaurenoic acid)。首次利用反相HPLC建立了五加酸和貝殼烯酸的定

6、量分析方法，確定了最佳色譜條件：檢測(cè)波長(zhǎng)為207nm，柱溫為30℃，流速為1.0ml/min，流動(dòng)相為乙腈-水(0～60min乙腈10％→100％，60～70min乙腈100％)。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，此方法簡(jiǎn)便快捷，準(zhǔn)確性高，適用于抗炎二萜成分的分離定量。同時(shí)對(duì)8種中韓五加屬植物根皮中的二萜成分五加酸和貝殼烯酸進(jìn)行定量分析，為制定一種五加屬植物新的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 五加屬植物中的揮發(fā)油多具有抗菌消炎、祛痰止咳之功效，也是主要

7、活性成分之一。采用水蒸氣蒸餾法提取8種中韓五加屬植物揮發(fā)油，然后用氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用技術(shù)對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行定性及定量分析。同時(shí)比較分析8種五加屬植物根皮揮發(fā)油的共有成分，多含有α-蒎烯、β-蒎烯、匙葉桉油烯醇和正-十六烷酸等，為五加屬植物進(jìn)一步開發(fā)利用提供研究依據(jù)。 本論文的研究結(jié)果對(duì)抗HMGBl藥物篩選具有重要的意義，為中草藥活性成分闡明、植物化學(xué)分類學(xué)和新藥篩選提供重要的理論依據(jù)，對(duì)我國(guó)天然植物資源的開發(fā)利用以及中草藥