藥用植物夾竹桃葉活性成分研究.pdf

1、本文對夾竹桃葉的主要成分進行了分析，研究了夾竹桃葉多糖和糖蛋白的提取工藝，對多糖和糖蛋白進一步分離純化得到純品后，進行了多糖的結(jié)構(gòu)、單糖的組成及糖蛋白的等電點、分子量的研究。
　　 結(jié)果表明，夾竹桃葉鮮樣中水分含量約為65.11%，干燥后樣品中主要物質(zhì)含量分別為粗纖維36.05%、糖類9.65%、總蛋白7.26%，總灰分6.32%、多糖6.96%、粗脂肪3.25%、還原糖2.69%，其它27.82%。
　　 在單因素實驗

2、基礎(chǔ)上,根據(jù)Box-Benhnken的中心組合實驗設(shè)計原理采用三因素三水平的響應(yīng)面分析法，對夾竹桃葉多糖的提取工藝進行了優(yōu)化。依據(jù)回歸分析確定各工藝條件的主要影響因素，得到最優(yōu)工藝條件為提取溫度 88.2℃，提取時間 3.0h,料液比1:45，提取兩次多糖得率可達6.73%。
　　 通過乙醇沉淀，除蛋白，脫色，柱層析分離，光譜分析及薄層層析等方法對夾竹桃葉多糖進行分析。結(jié)果表明，醇沉、除蛋白、脫色的最佳工藝條件為：4倍無水乙醇沉

3、淀8h，TCA法除蛋白，大孔樹脂AB-8脫色。透析后的多糖經(jīng)DEAE-cellulose 52纖維素柱層析和Sephadex G-200柱層析分離純化，表明該多糖為均一組分多糖。經(jīng)分離純化后的精多糖幾乎不含游離蛋白和核酸類物質(zhì)，且以β-糖苷型吡喃糖為主，單糖組成中含有葡萄糖，可能含有阿拉伯糖、巖藻糖和果糖。
　　 夾竹桃葉糖蛋白提取工藝優(yōu)化是在Plackett-Burman實驗和最陡爬坡實驗基礎(chǔ)上，根據(jù)Box-Benhnken的

4、中心組合實驗原理采用三因素三水平的響應(yīng)面分析法，得到最優(yōu)提取條件為料液比1:18.5；鹽濃度0.03；pH 8.4，在此條件提取一次后夾竹桃葉糖蛋白量可達3.424mg/g。
　　 硫酸銨沉淀，透析后的夾竹桃葉糖蛋白，經(jīng)DEAE-cellulose 52離子交換層析和Sephadex G-200凝膠過濾層析分離純化后，得到一個組分較為單一的糖蛋白，該糖蛋白等電點為pH5.9，經(jīng)SDS-PAGE分析，結(jié)果表明，該糖蛋白電泳后有三條